ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Прием II. Качественные флуоресцентные реакции из "Люминесцентный анализ" Из примеров, приведенных в первой главе, видно, что наблюдения люминесценции могут быть использованы во многих областях науки и практики. В настоящее время люминесцентный анализ применяют в технике, в медицине, в геологии, в химии, в сельском хозяйстве и т. д. Ясно, что при таких условиях объекты исследования и характер разрешаемых вопросов исключительно многообразны, и в этом состоит особенность методов исследования, основанных на наблюдениях люминесценции. Эти методы объединяют под общим названием люминесцентный анализ . Случаи его применения носят в значительной степени индивидуальный характер, тем не менее представляется возможным группировать анализы по признаку применяемых приемов, несмотря на различие не только объектов исследования, но и преследуемых целей. [c.59] Например, определение содержания витамина В в молоке и использование флуоресцентного метода в геолого-поисковой работе для обнаружения залежей нефти — оба эти анализа, несмотря на свое внешнее различие, должны быть отнесены к одному и тому же тину в обоих случаях но флуоресценции вещества обнаруживают его присутствие и определяют содержание. Биолог же, который изучает скорость циркуляции крови в теле путем впрыскивания кролику в ухо флуоресцентного раствора и наблюдения промежутка времени, по истечении которого флуоресценция обнаруживается в крови другого уха, и геолог, устанавливающий, есть ли связь между природными водоемами путем подкрашивания флуоресцеином воды в одном из них, — оба исследователя тоже используют по существу один и тот же прием, но уже иной, резко отличный от упомянутого выше. Классификация многообразных применений люминесцентного анализа по признаку используемых приемов (независимо от того, какова цель и объект исследования) облегчит специалисту любой области выбрать задачи, для разрешения которых люминесцентный метод может оказаться более эффективным, чем другие методы, а ири проведении анализа поможет правильно использовать соответствующий прием, правильно вести наблюдения. [c.59] ВОЛН — к красному концу нафталин флуоресцирует в ближнем ультрафиолете, антрацен — синим светом, аминонафталин — зеленым, и т. д. [c.61] Среди наиболее распространенных органических соединений, к сожалению, преобладает цвет флуоресценции фиолетовый и синий, реже встречаемся с зеленым цветом флуоресценции красным светом светятся, как видно из таблиц, порфирины, хлорофилл и сравнительно немногие другие соединения. [c.61] Остановимся подробнее на обоих направлениях работы. [c.61] Ильиной установлена возможность использовать в спектрально-аналитических целях не только флуоресценцию, но и длительное свечение фосфоресценцию, обнаруженную ею у нолициклических ароматичесгшх соединений в замороженном состоянии и д.лящуюся в некоторых случаях свыше 1 сек [2]. К аналогичному выводу приходят авторы работы 1957 г. [5]. [c.62] На примере двух изомерных соединений Ильина показала, что спектры их фосфоресценции отчет.ливо различаются, хотя спектры флуоресценции почти одинаковы. Фосфоресценцию представляется возможным использовать для аналитических целей и в тех случаях, когда на фоне люминесценции смеси не удается выявить интересующий компонент по его флуоресценции, но это оказывается осуществимым при наблюдении послесвечения компонента, выявляющегося на темном фоне нефосфоресциру-юще11 анализируемой смеси. [c.62] В некоторых случаях целесообразно усложнять первый прием применением для возбуждения люминесценции узких спектральных участков разной длины волны (см. гл. VI и XV). [c.62] Наконец, отметим, что применение светофильтров, позволяющих вырезать из суммарного люминесцентного излучения только интересующий спектральный участок, делает иногда возмон-гным определять нужный компонент, несмотря на присутствие флуоресцирующих примесей. [c.62] Рассмотрим теперь усложнение методик, связанное с разделением многокомпонентных систем. [c.62] Во многих случаях разделение осуществляется обычными химическими приемами извлечения нужных компонентов или удаления примесей методами экстрагирования, адсорбирования, соосаждения и т. д. [c.62] Для ориентировочного суждения о люминесцирующих компонентах смеси нередко применяют капиллярный анализ на подвешенной полоске бумаги, погруженной концом в исследуемый раствор, вещества выявляются по образующимся на полосе люминесцирующим зонам. [c.62] Еще более эффективно применение хроматографии М. С. Цвета 61, в частности люминесцентной хроматографии, с последующим изучением выделяемых зон экспресс-реакциями. [c.62] чоны были настолько малы, что отделить их пе удалось. [c.62] В методическом отношении заслуживает внимания метод хроматографирования (на колонке силикагеля), позволивший его авторам [81 с точностью до 1 % определять в горючем содержание трех типов углеводородов ароматических, олефиновых и насыщенных. Границы между зонами обнаруживались путем добавления к анализируемому образцу смеси красителей малорастворимый нефлуоресцирующий краситель окрашивает в красный цвет границу спирт — углеводороды краситель, флуоресцирующий синим светом, отчетливо выявляет границу между аромати-кой и олефинами, а флуоресцирующий желтым светом — между олефинами и насыщенными углеводородами. [c.63] В пятидесятых годах предложен и наптел широкое применение исключительно чувствительный и эффективный метод хроматографирования на бумаге. Осуществляется оно следующим образом на бумажную полосу на некотором расстоянии от ее нижнего (или верхнего) края наносят каплю раствора, содержащего те или иные вещества подсушив каплю, погружают полосу ее нижним (или загнутым верхним) концом в растворитель всю систему помещают в плотно закрытый сосуд для избежания испарения растворителя. При таких условиях начинается восходящий (или нисходящий) ток жидкости по бумаге, и если первоначально нанесенные на нее вещества растворимы в примененном растворителе, то они вместе с ним тоже продвигаются по бумаге, но с различной скоростью. [c.63] Обычно при бумажной хроматографии применяют растворители, состоящие из нескольких жидкостей с неодинаковой способностью продвигаться по бумаге. Компоненты хроматографируемой смеси по-разному распределяются между жидкостями растворителя и водноцеллулозньш комплексом отсюда название разделительной хроматографии 19]. На хроматограмме получаются зоны ( пятна ), соответствующие отдельным компонентам смеси. [c.63] Если первоначально нанесенные капли содержат смесь нескольких иеш,еств, то на хроматограмме они располагаются в соответствии со значениями их и это дает возможность идентифицировать но компоненты, образовавшие обнаруженные на хроматограмме пятна . [c.64] Если вещество в пятне не окрашено и не флуоресцирует, то для его выявления хроматограмму обрабатывают (например, обрызгивают) соответствующим реактивом, и пятна начинают люминесцировать, или при другом варианте реактив вызывает свечение бумаги, и пятна выделяются на ней, как темные места па ярко флуоресцирующем фоне [10]. Для выявления терпенов с реакционноспособными двойными связями применен следующий метод готовую хроматограмму опрыскива.ли 0,05%-ным раствором флуоресцеина и затем держали в парах брома. Пятна терпенов связывают бром быстрее флуоресцеина светятся они желтым светом и отчетливо выявляются на фоне розовой флуоресценции эозина, образовавшегося из флуоресцеина [11]. [c.64] Вернуться к основной статье