ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методические указания по определению топсинов НФ-35 и НФ-44 в воде, овощах и фруктах методом хроматографии в тонком слое из "Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде" Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,2—5 мкг. Нижний предел обнаружения 0,2 мкг. Пределы определения для анализа воды 0,005 мг/л, для овощей и фруктоз 0,1 мг/кг. [c.146] Варьирование степени определения 75—100%. Среднее значение степени определения стандартных количеств пестицидов 90 /о- Стандартное отклонение 8,2. Относительное стандартное отклонение 9. Доверительный интервал среднего при а = 0,95 и л=4—8,2 с=90 8%. Определению могут мещать производные тио-и дитиофосфорной кислоты, имеющие близкое значение величины Rf. [c.146] Реактивы и растворы. Хлороформ х. ч. Натрий сернокислый безводный, х. ч. Окись алюминия для хроматографии, просеянная через сито 100 меш (размер отверстий 0,147 мм). Кальций сернокислый ( aS04-2H20) ч. д. а. Просушивают в сушильном шкафу при 160 С в течение 6 ч. Гексан х.ч. Этилацетат х.ч. Ртуть уксуснокислая х.ч. Дифенилкарбазон х.ч. Этиловый спирт 96%-ный. Проявляющий реактив 0,25 г уксуснокислой ртути растворяют в 1 мл дистиллированной воды, прибавляют 1 мл ледяной уксусной кислоты и доводят до 100 мл этиловым спиртом. 0,05 г дифенилкарбазона растворяют в 100 мл этилового спирта. Перекись водорода, 3%-ный раствор. Стандартный раствор топсина НФ-35 и НФ-44—100 мкг/мл в хлороформе (10 мг топсина растворяют в 100 мл хлороформа). [c.146] Приборы и посуда. Пластинки для хроматографии. Пульверизаторы стеклянные для опрыскивания пластинок. Пипетки для нанесения проб. Прибор для отгонки растворителя. Камера для хроматографирования. Микропипетки для нанесения стандартных растворов. Колбы для экстракции. Воронки. [c.146] Подготовка к определению связана с приготовлением пластинок. Смешивают 50 г окиси алюминия, 5 г сернокислого кальция и 75 мл дистиллированной воды. Если сорбционная масса быстро загустела, следует добавить еще воды. Массу тщательно растирают и наносят на пластинки. Порция рассчитана на восемь пластинок размером 9X12 см. Пластинки сушат на воздухе. [c.146] Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта из овощей, фруктов. Навеску пробы (яблоки, виноград, томаты и др.) 10 г тщательно измельчают. Заливают хлороформом так, чтобы растворитель покрыл пробу, и экстрагируют 2 раза в течение 1 ч. Экстракт сливают через воронку, наполненную безводнььм сернокислым натрием, в колбу для концентрирования растворителей, затем его упаривают до 1 мл. Остатком экстракта тщательно ополаскивают колбу, упаривают его на воздухе до 0,2—0,1 мл и наносят на пластинку. [c.146] Экстракция и очистка экстракта из воды. Пробу воды 200 мл помещают в делительную воронку на 0,5 л и прибавляют 25 мл хлороформа, предварительно насыщенного водой (100 мл хлороформа встряхивают с 10—15 мл дистиллированной воды, излишек воды сливают). Встряхивают смесь 2 мин. Экстракцию повторяют с 25 мл хлороформа. Экстракты объединяют. Фильтруют через слой безводного сернокислого натрия и упаривают почти досуха. [c.146] Хроматографирование. Хроматографическую пластинку перед нанесением пробы активируют в сушильном шкафу при температуре 120°С в течение 40 мин. Подготовленные экстракты наносят на хроматографическую пластинку, тщательно ополаскивая хлороформом порциями по 0,2 мл. На эту же пластинку наносят стандартные растворы, содержащие 1, 2 и 4 мкг препарата. [c.146] Пластинку помещают в камеру для хроматографирования. Подвижный растворитель — смесь гексана и этилацетата (3 2) заливают в камеру за 5 мин до начала хроматографирования. [c.146] Величина Л/ топсина НФ-35 — 0,6 топсина НФ-44 — 0,35. [c.147] Методика определения бетанала в тканях внутренних органов теплокровных, крови, моче тонкослойной хроматографией. Основные положения. Принцип метода. Метод основан на извлечении препарата из исследуемой пробы органическим растворителем, концентрировании его и хроматографировании в тонком слое окиси алюминия. Подвижная фаза — смесь хлороформа и этилового спирта (20 1). Зоны локализации пестицида обнаруживают по реакции взаимодействия с диазотирован-ной сульфаниловой кислотой, либо с /г-диметиламинобензальдегидом, либо с 4-аминоантипирином в присутствии окислителя надсернокислого аммония. [c.148] Метрологическая характеристика метода. Минимально определяемое количество бетанала в хроматографируемой пробе 3 мкг. Нижний предел определения в ткани внутренних органов — 0,5 мг%, в крови — 0,4 мг%, в моче —0,02 мг%. Степень определения 89 И,5%. [c.148] Реактивы и растворы. Окись алюминия для хроматографии. Кальций сернокислый х.ч., безводный (медицинский гипс просущивают при 100—110°С в течение 3—4 ч). Хлороформ х.ч. Этиловый спирт 96%-ный. Натр едкий, 5%-ный раствор. Сульфаниловая кислота х. ч. ге-Диметиламинобензальдегид х. ч. 4-Ами-ноантипирин х.ч Аммиак, удельная масса 0,9. Аммоний надсернокислый, 20%-ный раствор, х.ч. Натрий углекислый, 5 /о-ный раствор. Натрий азотнокислый х.ч. Кислота соляная, 20%-ный раствор. Кислота уксусная, 40%-ный раствор. Диэтиловый эфир для наркоза. Этилацетат х. ч. Натрий сернокислый безводный, X. ч. [c.148] Реагенты для проявления хроматограмм 1 (раствор 4-аминоантипирина 2%-ный, срок хранения на холоде 1 месяц) Л 2 (щелочной раствор диазотиро-ванной сульфаниловой кислоты. Диазотированная сульфаниловая кислота готовится следующим образом. 4 г сульфаниловой кислоты растворяют в 60 мл 5%-ного раствора углекислого натрия, прибавляют 2 г азотистокислого натрия, медленно приливают этот раствор к 20 мл 20%-ного раствора соляной кислоты, охлажденной льдом, и энергично размешивают. Выпавший осадок отмывают на воронке спиртом и сушат фильтровальной бумагой. Хранят в темном месте) 3 (раствор и-диметиламинобензальдегида, 1%-ный раствор в 40%-ном растворе уксусной кислоты). Стандартный эфирный раствор бетанала 100 мкг/мл действующего начала. Хранят в холодильнике. [c.148] Подготовка к определению связана с приготовлением хроматографических пластинок. Смешивают 50 г окиси алюминия с 5 г сернокислого кальция (предварительно просеивают через сито 100 меш). Смесь растирают пестиком, переносят в коническую колбу на 250 мл, прибавляют 70—75 мл дистиллированной воды и перемешивают взбалтыванием до образования однородной массы. Из образовавшейся сорбциоиной массы 8—10 г наносят равномерным слоем на пластинку. Сушат при комнатной температуре. Хранят в эксикаторе. [c.149] Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта из внутренних органов (печень, почки, селезенка, сердце, легкие, головной мозг). Органы промывают физиологическим раствором, помещают в стаканчик. Навески 1 г помещают в гомогенизатор и растирают в течение нескольких минут, постепенно прибавляя 0,1 М фосфатный буфер (всего 5 мл). Полученный гомогенизат количественно переносят в делительную воронку и экстрагируют 20 мл диэтилового эфира (в качестве экстрагента можно использовать этилацетат). Экстрагирование проводят дважды. Объединенные экстракты концентрируют, предварительно пропустив их через безводный сульфат натрия, до 0,2—0,5 мл. [c.149] Экстракция и очистка экстракта из крови. Пробу 2 мл цельной крови, собранной в чашки, смоченные предварительно раствором лимоннокислого натрия или гепарином, помещают в пробирки с притертыми пробками. Приливают 5 мл диэтилового эфира и экстрагируют встряхиванием в течение 30 мин. Экстракт сливают и операцию повторяют дважды. Объединенные экстракты фильтруют через сернокислый натрий и концентрируют до объема 0,2—0,5 мл. [c.149] Вернуться к основной статье