ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методы с измерением активности отдельных фракций из "Радиохроматография" По всей вероятности, основным недостатком непрерывных методов измерения активности в ГЖРХ является меньшая чувствительность по сравнению с методами измерения активности отдельных фракций. Это обусловлено сравнительно коротким временем регистрации в случае непрерывных методов. Если меченое соединение каким-либо способом улавливать из газового потока, то для получения точных количественных данных можно использовать наиболее подходящий способ измерения активности и оптимальное время регистрации. Существующие способы улавливания довольно просты, а для измерения активности можно применять обычные приборы, например жидкостный сцинтилляционный счетчик. [c.218] НОГО счета. Этот способ сочетает преимущества сжигания с высокой чувствительностью жидкостного сцинтилляционного счета. [c.219] На практике поток газа после хроматографической колонки разделяется. Меньщая часть (25%) направляется в пламенно-ионизационный детектор, а большая часть (75%) поступает в печь для сжигания, которая включает кварцевую трубку, заполненную окисью меди и стальной шерстью . Газовый поток, содержащий 002, осушается в ловушке с перхлоратом магния и проходит далее через ряд сосудов, заполненных улавливающим раствором, который представляет собой смесь препарата Omnifluor (NEN 4 г/л) и гидроксида гиамина 10-Х (NEN) в соотношении 3 1,8. Каждый сосуд снабжен соленоидным клапаном, который управляется вручную. Газовый поток проходит через данный сосуд в течение заданного времени, после чего направляется в другой сосуд, содержащий свежий раствор. Практически полное улавливание достигается при скоростях газового потока до 75 мл/мин. [c.219] При использовании такого типа переключателя газового потока необходимо учитывать время, за которое газовый поток проходит расстояние между пламенноионизационным детектором и выходом из печи для сжигания, так как ионизационный детектор находится непосредственно у выхода из колонки. Особенно важно учитывать эту поправку при выходе с колонки компонентов с близкими значениями времен удерживания. [c.219] Этот метод Треннера и сотр. обладает очень высокой чувствительностью и позволяет удовлетворительно регистрировать пробы, активность которых менее 0,5 нКи. [c.219] Дуглас и Блэк [36] недавно описали другой эффективный способ улавливания. Они использовали трубки из пирексового стекла, заполненные флорисилом (80— 100 меш), на который нанесено 3% фазы Dow orning D 200. Этот экономичный способ, позволяющий улавливать 90% вещества, использовали при работе с мечеными стероидами, алкалоидами и аминами. [c.219] СКОЛЬКИХ повторных анализов обрабатываются компьютером и записывается усредненный результат. Прибор позволяет легко анализировать пробы с удельной активностью всего 1—10 нКи/мг. [c.221] Каждый из этих методов имеет свои преимущества и недостатки. Перед началом работ необходимо установить, какой из методов позволит наилучшим образом решить задачи, возникающие в конкретном исследовании. Ниже обсуждаются некоторые вопросы, которые следует учитывать при выборе конкретного метода. [c.221] Поскольку чувствительность детектирования в проточной системе увеличивается при уменьщении скорости потока, то нужно устанавливать такую скорость, которая еще не приводит к ухудшению разрешения. [c.222] Наиболее эффективный способ сохранения разрешения, полученного на колонке для ГЖХ, — это сбор очень малых фракций, который является, однако, длительной и трудоемкой процедурой. Как отмечалось, при работе с пропорциональным счетчиком объемом 10—12 мл не происходит существенного перемешивания разделенных компонентов при условии, что скорость газа не слишком мала. [c.222] В системах с использованием жидкого сцинтиллятора, когда выходящий из колонки газ непрерывно пропускается через один и тот же раствор, данные получаются в интегральной форме, и количество радиоактивности в сцинтилляторе растет со временем. В этом случае бывает трудно зарегистрировать и точно измерить компонент смеси с малой активностью, который следует за компонентом с большой активностью (см. рис. 7.2). [c.223] Разрешение, достигаемое при помощи автоматизированного метода с жидкостным сцинтилляционным счетом, предложенного Томасом и Даттоном [37], показывает, какой точности можно достичь при сборе отдельных фракций. [c.223] Хроматографы для ГЖРХ довольно просты в обращении, и через час после их включения уже можно получить результаты. Одним из недостатков сбора фракций является то, что последующая обработка их перед измерениями активности занимает довольно много времени. Такая обработка может быть сведена к минимуму, если собирать отдельные компоненты смеси по мере их выхода из колонки, а не отбирать фракции через определенные промежутки времени. Это несложно сделать, если использовать массовый детектор, например пламенно-ионизационный, для наблюдения за выходом разделенных компонентов из колонки. Однако пик, обнаруженный таким способом, необязательно обусловлен радиоактивным веществом. [c.223] Некоторые из методик, описанных в этой главе, требуют существенных затрат времени на проведение анализа и поэтому могут оказаться неприемлемыми при проведении поточных измерений. [c.223] Методы непрерывного контроля в ГЖРХ, использующие сжигание проб или их растворение в жидком сцинтилляторе, являются разрушающими однако количество вещества, необходимое для анализа, обычно очень мало. В тех случаях, когда количество соединения для анализа очень ограничено или стоимость его получения высока, следует применять метод с улавливанием разделенных компонентов, так как при этом сохраняется вся проба. Правда, часть ее неизбежно расходуется на измерение активности фракций. [c.224] Существует довольно много способов сбора фракции при проведении ГЖРХ, и, как правило, сам процесс ГЖХ не изменяется в зависимости от применяемого способа сбора фракций. При использовании непрерывных методов регистрации следует обращать внимание на некоторые особенности самого процесса хроматографического разделения, от которых зависит качество конечного результата. [c.224] Этот прибор также укомплектован измерителем расхода газа. [c.226] Вернуться к основной статье