ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Приборы для получения колоночных хроматограмм из "Хроматография в биологии" Принцип конструкции прибора для получения хроматограмм очень прост. Основной частью хроматографического прибора является хроматографическая колонка, которая состоит из стеклянного или металлического цилиндра, заполненного порошкообразным или волокнистым материалом (адсорбентом или носителем). В практике употребляются колонки различных размеров в зависимости от количества исходных веществ, подлежащих хроматографированию. В современной хроматографии для микроанализа используются хроматографические колонки диаметром 1—2 мм и высотой в несколько сантиметров в промышленности же сооружаются хроматографические колонны высотой в несколько метров и диаметром до 1 м . [c.22] Наиболее употребительные в биологии хроматографические колонки изображены на рис. 4. [c.22] Самая простая хроматографическая колонка может быть изготовлена следующим образом. Берут стеклянную трубку диаметром 5 — 10 мм и высотой 10 — 20 см. Один конец этой трубки оплавляют, так чтобы осталось маленькое отверстие для вытекания фильтрата. Этот оплавленный конец трубки закладывают ватным тампоном. Затем трубку заполняют пористым материалом, на котором может происходить образование хроматограммы. [c.22] Способ заполнения трубки сухим пористым материалом имеет ряд недостатков. Так, например, при фильтрации жидкости через сухой материал в его порах остается значительное количество пузырьков воздуха, которые снижают рабочую поверхность пористого материала и нарушают режим потока жидкости. Существенным недостатком сухого метода является и то, что многие применяемые в хроматографическом анализе адсорбенты и носители имеют способность к набуханию, которое приводит к постепенному изменению многих параметров, характеризующих режим работы колонки. Иногда набухший материал настолько плотно заполняет все поры, что фильтрация жидкости прекращается. В некоторых случаях развивается чрезвычайно сильное давление набухания, что приводит к разрыву трубки. Указанные недостатки легко устраняются при наполнении трубки адсорбентом, суспендированным в каком-либо растворителе. Для удаления пузырьков воздуха суспензию нагревают до 70—80 . При работе с набухающими материалами (например, синтетическими смолами) приготовленную суспензию необходимо выдерживать в растворителе в течение 1—2 суток, прежде чем вносить ее в трубку, так как процесс набухания происходит иногда очень медленно. [c.24] Приготовленная по последнему способу колонка во избежание высыхания пористого материала колонки должна быть все время заполнена растворителем. [c.24] Для ускорения фильтрации при проведении хроматографического опыта Цвет предложил применять избыточное давление. Последнее можно создать либо путем откачивания воздуха насосом из отсасывательной склянки, соединенной с фильтром, либо специальным нагнетательным. приспособлением. В одном из приборов, сконструированном Цветом, в качестве нагнетательного устройства использовалась простая резиновая груша. [c.24] Такая установка, например, была предложена Е. М. Титовым (1947) (рис. 5). В этой установке для создания повышенного давления над слоем адсорбента используется баллон с индифферентным сжатым газом. Давление регулируется при помощи редукционного вентиля. Величина избыточного давления устанавливается в 350—450 мм рт. ст. [c.25] Вернуться к основной статье