ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Изучение однородности антибиотиков из "Бумажная хроматография антибиотиков" КОМ [184, 185]. Аналогичное явление отмечено в отношении эно-мицина [42]. При изучении янтинеллина наряду с биоавтографическим методом применяли несколько качественных реакций с перманганатом калия, концентрированной серной кислотой, о-толидином [25]. Во всех этих случаях наблюдалось только одно пятно, совпадающее по положению с зоной подавления тест-микроба. Биоавтографические методы комбинировали также с физическими, проводили обнаружение антибиотиков по поглощению УФ-света, люминесценции [121, 136], а также радиометрическими методами в случае радиоактивных веществ. Если расположение радиоактивного пятна совпадало с зоной подавления, то это доказывало, что в изучаемом препарате меченым является только антибиотик [159, 186, 187] (рис. 15). При помощи хроматографии на бумаге можно не только определить гомогенность радиоактивного препарата, но также вычислить удельную радиоактивность [160, 188], используя количественные биоавтографические методы. [c.24] При изучении однородности антибиотиков методом хроматографии на бумаге следует постоянно иметь в виду возможность ошибок при неправильном истолковании результатов. Особенно осторожно необходимо оценивать выводы об однородности вещества, сделанные на основании- наличия на хроматограммах только одного пятна даже при хроматографировании в нескольких системах. Дело в том, что данные хроматографии на бумаге нельзя подвергнуть математической обработке, в отличие, например, от метода противоточного распределения. [c.24] Система к-бутанол — пиридин — вода (1 0,6 1). [c.28] Даже несколько пятен в средней части хроматограмм (также, как и на стартовой линии) не всегда доказывает независимое существование различных веществ в исследуемом препарате. Для того чтобы определить, действительно ли произошло разделение, можно использовать два метода. Во-первых, провести препаративное разделение и повторное хроматографирование и, во-вторых, использовать метод так называемой диагональной хроматографии , т. е. двумерной хроматографии в одной и той же системе растворителей. При повторном хроматографировании независимо существующие вещества продвинутся на такое же расстояние, как и при первом, и расположатся на диагональной линии, проходящей через стартовую точку. Если же одно из веществ переходит в процессе хроматографирования в другое, то на хроматограмме выявятся пятна, которые не лежат на диагональной линии. [c.29] Появление на хроматограммах нескольких пятен при нанесении одного вещества часто объясняется превращениями его во время хроматографирования. Так, например, происходит гидролиз эфиров макролидных антибиотиков с образованием исходных препаратов [207]. Рифамицины Б и О в процессе хроматографирования превращаются в рифамицин 5 и рифамицин 51/, соответственно. Этого можно избежать, если в систему для разделения рифамицинов включать аскорбинат натрия [208]. Гри-зеолютеин В в процессе хроматографирования на бумаге превращается в гризеолютеин А, в результате чего образуются два пятна [209]. [c.29] Образование дополнительных пятен, не вызванных разделением препаратов на компоненты, может быть связано с действием солей, как это показано в случае стрептомицина [213, 214]. Соли вызывают десорбцию стрептомицина, и антибиотик вымывается системой. Образуется быстро перемещающаяся зона (рис. 20). Действие солей может быть обратным. Так, например, препарат целикомицина, содержащий значительное количество солей, хроматографируется как одно пятно, между тем обессоленный препарат разделяется на три компонента (рнс. 21). [c.31] Результаты всех этих исследований показывают, что побочные эффекты, накладывающиеся на процесс распределения при хроматографировании, встречаются гораздо чаще, чем обычно предполагают. Поэтому следует очень осторожно оценивать результаты хроматографического разделения, особенно если оно не подтверждено повторным хроматографированием в той же системе. [c.31] В некоторых случаях бумажную хроматографию использовали для контроля содержания антибиотиков в биологически неактивных или малоактивных препаратах примеси пенициллинов в препаратах 6-АПК [215], хлортетрациклина в продуктах его деградации [216], канамицина С среди продуктов его расщепления [217]. Было показано, что биологическая активность некоторых партий альбонурсина связана с незначительной примесью высокоактивного антибиотика альбофунгина [218]. [c.32] Вернуться к основной статье