ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Фиксация атмосферного азота in vitro ферментными препаратами, выделенными из клубеньков бобовых и из неинфицированных бактериями высших растений из "Азотное питание растений и применение азотных удобрений" Отделенные от корней бобовых клубеньки замораживались жидким азотом и затем измельчались. Тонкоизмельченная. масса клубеньков использовалась для извлечения азотфикси-рующего фермента непосредственно или предварительно экстрагировалась ацетоном до полного обезвоживания и затем экстрагировалась эфиром. В последнем случае получался порошковый продукт, который потом использовался для извлечения фермента. [c.215] Кроме такого метода, применялся и другой — экстрагирование измельченной сухой массы клубеньков водным 60%-ным этиловым спиртом полученный экстракт использовался в опытах в качестве источников азотфиксирующего фермента. Испытания активности выделенных препаратов производились в герметической камере в атмосфере, обогащенной N2 . Было найдено, что азотфиксирующая активность препаратов фермента заметно повышается при добавлении некоторых веществ, могущих служить в качестве активаторов фермента, переносчиков водорода, акцепторов продуктов ферментативного синтеза и источника энергии. В качестве таких веществ применялись магний, молибден, биотин, пируват, аскорбиновая кислота, АТФ. Все добавки вводились в камеру в буферном фосфатном растворе pH 6,8 при общем объеме жидкости 35— 40 мл. [c.215] Таким образом, выделенные препараты фермента катализируют in-vitro фиксацию атмосферного азота с образованием аммиака в качестве конечного неорганического продукта фик-сации,- Неизмельченные клубеньки, изолированные от корней люпина за 24 часа до опыта, и взвесь бактерий Rhizobium, выделенных из клубеньков люпина, не фиксировали азота. Удельная активность фермента обычно выражается числом -оборотов, т. е. числом молей субстрата (в данном случае N2), прореагировавшего за 1 минуту с одним молем фермента. Для тех случаев, когда молекулярный вес фермента неизвестен, его принимают за 100000. [c.216] ферментные препараты, выделенные из этих небобо-вых растений, в условиях описанных опытов могут фиксировать азот. По-видимому, и в других небобовых растениях присутствуют в неактивном состоянии азотфиксирующие ферменты, н, может быть, когда-нибудь удастся найти такие методы воздействия на растения, которые приведут в движение этот механизм и заставят его фиксировать атмосферный азот. [c.219] Вернуться к основной статье