ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Посев на твердую среду из "Биология Том2 Изд3" С помощью этого метода можно выделять бактерии из естественных мест обитания, например из почвы, молока, воды. Образцы твердых субстанций, таких как почва, лучше суспендировать в небольшом количестве воды, либо предварительно проинкубировать в жидкой среде. Безопасным источником для рутинной работы является пастеризованное молоко. Перед тем как проводить эксперименты с бактериями или грибами, следует ознакомиться с инструкциями и правилами безопасности, чтобы снизить до минимума риск культивирования вредных организмов. [c.47] Этот метод проиллюстрирован на рис. 12.5. Он удобен для посева микроорганизмов из жидкой суспензии на твердую среду. Метод применяется для определения числа жизнеспособных клеток в пробе после серийных разведений (см. разд. 12.6.1). Его можно использовать также для получения сплошного газона микроорганизмов на поверхности агара после густого посева. Это удобно при анализе активности ингибиторов, таких как антибиотики или дезинфицирующие вещества, которые добавляют в сделанные в агаре углубления либо наносят на диски из фильтровальной бумаги, размещенные на поверхности агара. Ингибитор диффундирует через агар, образуя зону подавления роста вокруг отверстий или дисков фильтровальной бумаги, которая видна после инкубации. Диаметр зоны может служить мерой степени ингибирования. [c.47] Этот метод, альтернативный методу посева на поверхность агара, используется для инокуляции клеток из жидкой культуры, а также для подсчета жизнеспособных клеток. Поскольку клетки распределены по всей среде, а не только по поверхности агара, можно подсчитать гораздо большее их количество — до 1000 колоний на чашку. Однако размеры выросших колоний значительно меньше (рис. 12.6). [c.47] Заполните петлю культурой, если она находится в жидкой среде. Прикоснитесь к культуре петлей, если она находится на твердой среде. Приоткройте крышку чашки Петри, насколько требуется, и легким касанием распределите пробу, как показано на рисунке, не повреждая поверхность агара. [c.48] Беритесь за ручку петли примерно в середине (в точке равновесия) и держите петлю плоско. [c.48] Распределите жидкость по поверхности агара с помощью шпателя, одновременно поворачивая чашку, чтобы покрыть всю поверхность. Подпишите донышко чашки и инкубируйте ее. [c.49] Подожгите спирт, пронеся шпатель через пламя бунзеновской горелки. Не оставляйте шпатель в пламени, так как он может треснуть. (Спирт возгорается при температуре, значительно меньшей, чем температура пламени бунзеновской горелки.) После того как спирт прогорит, остудите шпатель в течение 10 с. [c.49] После использования храните шпатель в стакане. [c.49] Подсчитайте число колоний. Это число соответствует количеству исходно инокулированных бактерий. [c.49] Метод используют для культивирования анаэробных организмов или организмов, растущих при низкой концентрации кислорода (микроаэрофилов). Обычно используют пробирку с питательной агаризованной средой. Благодаря небольшой поверхности и достаточно большой глубине агара в пробирке по сравнению с чашкой доступ ы1Слорода внутрь агара ограничивается. Посев производят прямой проволочкой (без петли), или бактериологической иглой. Небольшое количество культуры (твердой или жидкой) берут кончиком иглы и затем вертикально прокалывают ею агар (рис. 12.7). Культура растет в агаре во все стороны от линии прокола. [c.50] Вернуться к основной статье