ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Высшие уровни упаковки ядерных РНП-частиц и их взаимодействие с ядерным скелетом из "Гены высших организмов и их экспрессия" В электронном микроскопе на срезах ядерные гяРНП обычно выглядят как крупные глобулярные или неравномерные фибриллярные образования. Лишь в некоторых случаях в них удается сразу выявить исходную РНП-фи-бриллу с 308-частицами, сидящими на цепи РНК. Очевидно, что подобно тому как 100 А-фибрилла нуклеосом укладывается в структуры высшего порядка, так и первичная РНП-фибрилла подвергается дальнейшему складыванию и упаковке. Это тем более просто, что РНК в отличие от ДНК весьма гибкая молекула и никаких запретов для ее изгибания под любым углом нет. Какие законы управляют вторичным складыванием фибриллы РНП — не известно. Не исключено, что вторичное складывание играет важную роль в процессах сплайсинга, например сближая между собою границы интрона. [c.218] Наш метод выделения гяРНК из ядер печени крысы, включающий длительные экстракции разбавленными солевыми растворами при pH 7,8—8,0, базируется на слабом РНКазном гидролизе исходных комплексов, что ведет к их отщеплению от ядерного скелета. Очень слабая РНКазная деградация идет, очевидно, даже в присутствии ингибитора РНКазы. Именно поэтому наш метод оказался не эффективным при работе с ядрами, лишенными заметной РНКаз-ной активности (например, клетки Не Ьа). Тогда, однако, удавалось извлечь 308-частицы, если экстрагировать ядра не при 0°, а при 30°. [c.219] Чтобы избежать этих сложностей, многие авторы использовали вместо экстракции раствором НМТ, pH 8, механическое разрушение клеточных ядер с помощью ультразвука. При этом происходит эффективная солюбилизация гяРНК, но полученные частицы крайне гетерогенны по своему белковому составу — они практически не отличаются от препаратов ядерного матрикса, хотя и в их составе можно видеть информатин. [c.219] Вернуться к основной статье