ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Влияние индолил-3-уксусной кислоты на реакции пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты из "Пероксидаза как компонент антиоксидантной системы живых организмов" Исследование влияния ИУК на реакции пероксидазного окисления АК позволило установить [Рогожин, Рогожина, 2002], что ауксин ингибирует фермент по конкурентному типу при связывании в активном центре фермента одной молекулы аскорбиновой кислоты (рис. 16, а). Тогда как в реакциях пероксидазного окисления АК с участием двух и более молекул субстрата ИУК проявляла неконкурентный характер ингибирования (рис. 16, б). [c.71] Связывание ИУК с пероксидазой в реакциях конкурентного ингибирования достаточно прочное и составляет 5,4—20,5 мкМ, что соизмеримо с величинами констант связывания аскорбиновой кислоты и о-дианизидина. В реакциях неконкурентного ингибирования ИУК связывается с пероксидазой в 3,2—10,2 раза лучше, чем связывание второй молекулы АК. При этом величины констант ингибирования в реакциях неконкурентного ингибирования при pH 4,5—7,0 для ИУК равны 27,3—34,6 мкМ. [c.72] В активном центре пероксидазы имеется несколько функциональных групп, принимающих участие в ферментативном катализе. Однако природа этих групп пока не установлена [Андреева, 1988]. Предполагается, что в области связывания ароматических субстратов могут располагаться аминокислотные остатки Arg 38, Phe 142 и 143 [Аммосова и др., 1997]. При этом место связывания ИУК может находиться в структуре субдомена ауксин-связываю-щего участка вблизи Тгр 117, который может принимать участие в связывании ИУК пероксидазами растений [Савицкий и др., 1998]. [c.72] Таким образом, используя ИУК, можно предположить место локализации участка связывания молекул аскорбиновой кислоты в активном центре пероксидазы. По-видимому таким участком является дистальная область активного центра фермента. Связывание ИУК в этой области при низких концентрациях субстрата создает конкуренцию за участок связывания, проявляемую в реакциях пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты, когда в активном центре фермента связывается, по крайней мере, одна молекула субстрата. При связывании двух и более молекул аскорбиновой кислоты с пероксидазой наблюдается ускорение реакции окисления аскорбиновой кислоты, что, возможно, вызвано кооперативными взаимодействиями между участками связывания этих двух молекул субстрата. [c.73] Вернуться к основной статье