ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Предварительное насыщение парами многокомпонентных подвижных фаз из "Основы тонкослойной хроматографии Планарная хроматография Т.2" При работе со смесями растворителей основные эффекты, вызванные предварительным насыщение слоя (если они имеются), оказываются теми же, что при работе с чистыми растворителями снижаются отмечаемые значения Кг и образуется действительный фронт со всеми вытекающими из этого последствиями. Главное отличие от ситуации, характерной для чистых растворителей, состоит в зависимости от типа камеры. В ненасыщенных сэндвич-камерах реализовать предварительное насыщение не удается и, как следствие этого, наблюдается расслоение подвижной фазы при элюировании. [c.131] Такой эффект иногда называют эффектом фронтального анализа , или автохроматографии . Обнаруживается столько же фронтов, сколько компонентов с различной элюирующей способностью имеется в составе подвижной фазы (с1 . рис. 206). Высота самого нижнего фронта увеличивается при повышении концентраиии соответствующего компонента в подвижной фазе. При работе с обычными камера.ми, в которых предварительное насыщение слоя в какой-то степени всегда обеспечивается, градиенты, обусловленные расслоением подвижной фазы, сглаживаются более или менее полно. При возрастании концентраиии наиболее сильного ко.мпонента подвижной фазы это приводит к повышению дезактивации слоя ( снижает степень удерживания ), в результате чего пятна начинают проходить по пластинке с большим приближением друг к другу и, наконец, сливаются в одно пятно при Кг 0.5- 0.8. [c.131] Высота второго фронта, регистрируемого в ненасыщенной сэндвич-камере (обусловленного расслоением подвижной фазы), увеличивается при возрастании доли более сильного растворителя. Сопоставьте с эффектом, наблюдаемым прн работе с насыщенной обычной камерой Ы, (рнс. 191, а) а - ненасыщенная сэндвнч-камера 6 - насыщенная обычная камера (предварительное насыщение). [c.132] Предварительное насыщение смесью растворителей. [c.133] Различие ситуаций, отмечаемых при использовании двух типов камер для работы с двухкомпонентной подвижной фазой, иллюстрирует рис. 190. [c.134] Реальные хроматограммы, показывающие влияние предварительного насыщения слоя при употреблении смесей растворителей в качестве подвижной фазы, приведены на рис. 191, 193. Из рис. 191,а видно, каким образом характерные для смеси значения Ег первоначально увеличиваются при повышении концентрации метанола (дезактивирующее воздействие преобладает над последствиями предварительного насыщения), проходят через максимум и, наконец, начинают снижаться (поскольку воздействие предварительного насыщения, приводящего к снижению Ег, начинает сказываться сильнее дезактивации слоя). Этот же эффект показан и на рис. 193 при работе с другим типом силикагеля и с другой подвижной фазой, но при большем периоде предварительного насыщения (60 мин) в результате действительный фронт занимает довольно низкий уровень (Яг.= 0.6), что подтверждено маркером (краситель с Кг случай б). Хроматограмма на рис. 193, в получена при употреблении чистого ацетонитрила (как и в случае а, но при элюировании в насыщенной обычной камере, в которой смесь еще не удается разделить, хотя степень предварительного насыщения меньше (К ж 0.75 вместо 0.6). В том и в другом случаях элюирование только одним сильным компонентом подвижной фазы (ацетонитрилом) приводит к перемещению образца (без разделения) до действительного фронта (с К, = 1) разделение оказывается невозможным из-за низкого уровня этого фронта. Когда степень предварительного насыщения достигает характерной для сорбционного насыщения, ни одно из веществ не может иметь Ег свыше 0.5-0.6 при любой элюируюшей способности растворителя. [c.134] С ПОДВИЖНЫМИ фазами сложного состава, в который входят вода и ацетонитрнл. В таких случаях вместо регистрации фронта в виде узкой, ярко выраженной полосы могут наблюдаться пологие градиентные переходы. [c.135] Дезактивирование слоя парами воды н метанола. Активность пластннки с метанолом зависит от относительной влажности (9%). По причинам, легко объясняемым теоретически (из-за воздействия предварительного насыщения), при пользовании смесью метанола с бензолом пятна не могут иметь Rs свыше 0.8. Элюирование бензолом. Силикагель G (фирма Мегск) контрольная смесь красителей камера Vario-KS. [c.135] СИЛЬНО влияет на селективность, но смесь метанола с бензолом, попавшая в слой из газовой фазы (при предварительном насыщении), вытесняется поднимающимся по пластинке бензолом выше, чем оказался бы действительный фронт (поскольку бензол не способен вытеснять адсорбированные молекулы воды из-за чего действительный фронт даже не образуется) эффект предварительного насыщения смесями растворителей наглядно иллюстрирует рис. 193. [c.137] Небольшие количества полярной добавки не дают заметного воздействия при использовании ненасыщенной сэндвич-камеры (если не считать веществ с Кг 0.2), как следует из рис. 223. Однако такая добавка может радикально повлиять на вид хроматограммы, получаемой при работе с насыщенной обычной камерой или при употреблении любой другой системы, допускающей возможность предварительного насыщения слоя (эта ситуация показана на рис. 194). Смесь красителей элюировали стабилизированным хлороформом, содержащим 1.5% этанола случай а соответствует работе с ненасыщенной сэндвич-камерой случай б - с насыщенной обычной камерой с предварительным насыщением слоя. Спирт уничтожил все следы активности в слое и, более того, ликвидировал разрешающую способность (что объясняется, по-видимому, тем, что смесь веществ 1+3+4 оказалась слишком близкой к действительному фронту при Кг я= 0.7). Наличие этанола в хлороформе (в последнее время стали применять хроматографически более нейтральные стабилизаторы) является классическим примером присутствия примесей в растворителях подобные примеси, если на них не обратить внимание, могут привести ко многим ошибкам (например, даже к помещению хлороформа не в том месте элюотропного ряда). [c.137] К состоянию обычной колонки более приближена система, обеспечиваемая в насыщенной обычной камере. Более подробно данный вопрос будет обсуждаться в гл. X. [c.138] Кинетика предварительного насыщения слоя. Рис. 191, б показывает, что сорбционного насыщения слоя удается почти достигнуть через 30 мин, но для доводки нескольких последних процентов необходимы весьма значительные затраты времени (до 3 ч), что нежелательно прн практической работе. Че.м выше относительная влажность, тем больше временн уходит на обеспечение равновесного состояния, соответствующего сорбционному насыщению. [c.138] Скорость улавливания паров двухком-понентных подвижных фаз. Силикагель. Сплошные линии смесь бензола с циклогексаном (80 20). Штриховые линии смесь циклогексана с ацетоном (70 30). Данные из публикации [174] I -бензол 2, 4 - циклогексан 3 - ацетон. [c.139] Вернуться к основной статье