ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методы количественного учета продуктов гидролива протеинов из "Технология белковых пластических масс" При воздействии на нерастворимые в воде протеины кислот или щелочей в первую очередь образуются растворимые в воде соединения, которые называют или кислотными или щелочными альбумина-тами. Как уже говорилось выше, в случае применения кислот, тут возможно образование солеобразных соединений с аминогруппами, в случае же применения оснований — солей, с карбоксильными группами протеинов. При удалении кислоты или щелочи протеин выпадает из раствора хлопьями. [c.12] При гидролизе происходит разрыв пептидных связей, гидроксил воды присоединяется к карбонилу с образованием карбоксильной группы, а водород — к имидогруппе с образованием аминогруппы. [c.13] В результате получаются кристаллические продукты определенного строения — пептиды и аминокислоты. Последние классифицируются по количеству входящих в состав их аминных и карбоксильных групп. Ниже приведены некоторые из аминокислот, выделенные нз белковых веществ. [c.13] Наименование аланина х-аминокислотой указывает на положение аминогруппы по отношению к карбоксильной группе а-положение есть положение этой группы у соседнего с карбоксилом углеродного атома. Если бы структурную формулу аминопропионовой кислоты мы написали иначе, а именно NHg Hg СНо СООН, то аминогруппа была бы в З-положенйи по отношению к карбоксильной группе такая кислота называется р-аминопропионовой кислотой. [c.13] Присоединяя к дипептиду еще одну молекулу какой-нибудь аминокислоты, можно получить трипептид и т. д. Э. Фишер синтезировал полипептиды, соединяя вместе до 18 аминокислот. Полученные таким образом синтетические продукты сходны с белковыми веществами некоторыми своими реакциями — они гидролизуются, как и белок, ферментами, превращаясь в аминокислоты. Однако это все-таки не протеины, а еще только промежуточные продукты между протеинами и аминокислотами. Полипептиды образуются из протеинов путем гидролитического расщепления последних, но в естественных гидролизатах не было обнаружено более сложных полипептидов, нежели пентапептид, т. е. построенный из пяти аминокислот. [c.17] Теория Э. Фишера о построении белковой молекулы из аминокислот с отщеплением воды от карбоксила одной и аминогруппы другой аминокислоты, с образованием группы — СО—ЫН —, встретила возражения со стороны других исследователей. Высказывались сомнения о наличии таких построений в белковой молекуле, а полипептиды и аминокислоты были признаны за вторичные образования в гидролизате. [c.17] СООН—СН.,—ЫН—СО—СНа — МНо = СНа СНо + Н О. [c.17] Наиболее основательное возражение заключается в стойкости таких циклических соединений по отношению к воздействию ферментов. Ферменты не расщепляют дикетопиперазинов в противоположность синтетическим продуктам, полученным Э. Фишером, которые расщепляются энзимами до аминокислот. Однако и критики не отрицают наличия дикетопиперазинов в Молекуле некоторых протеинов, главным образом склеропротеинов (рога, копыта и пр.), как раз не перевариваемых организмом животных. [c.17] Рассмотренный нами гидролиз протеинов щелочами и кислотами, с применением высоких температур слишком груб и не дает тех результатов, какие имеют место в организме. [c.18] В случае применения кислот, помимо расщепления молекулы протеина до аминокислот, происходят вторичные процессы, образующиеся продукты распада окисляются, соединяясь в циклические комплексы и дают темноокрашенные продукты, называемые гуминовыми веществами, более богатые углеродом, нежели протеины. [c.18] При щелочном гидролизе тоже протекают вторичные процессы кератины выделяют сероводород, что указывает на изменения цистина, аргинин превращается в орнитин с выделением мочевины, некоторые аминокислоты разрушаются с выделеним аммиака. [c.18] Протеины пищи животных, попав в организм, должны претерпеть гидролитическое расщепление до аминокислот, ибо, будучи коллоидами, они не способны проникать через полупроницаемые перегородки стенок кишечника и всасываться. [c.18] Гидролиз в организмах совершается при 37° и идет с участием ферментов. Ферменты, катализирующие гидролиз протеинов, ведут его последовательными ступенями для каждой степени гидролиза существует свой фермент. Этот процесс мы называем перевариванием. [c.18] помимо переваривания, в организме совершается созидание протеинов, которое так же должно катализироваться, должны существовать ферменты обратного действия или те же ферменты должны катализировать и синтетические процессы. [c.18] В наших лабораториях мало применялся ферментативный гидролиз протеинов. Причина этого лежит в неуменьи разделять ферменты, идентифицировать, очищать от примесей. Действие смеси ферментов, добываемых нами из желудочного сока животных, из секретов желез, из клеток организмов, не позволяет вести процесс распада строго по стадиям от протеина до аминокислоты аналогично ходу его в организмах, отклоняет реакцию в сторону получения вторичных образований и даже не исключает одновременно и синтеза (Данилевский). Только в самое последнее время Вильштетером, а за ним другими исследователями открыты способы очистки и изолирования ферментов один от другого. Эти успехи в области исследования ферментов, даже при нынешнем начальном, далеком от совершенства состоянии, дали в руки исследователей новое средство к изучению белковых веществ. Реакции с протеинами приближены к естественным, имеющим место в организмах условиям, а это во многом поможет разобраться в трудно разрешаемой белковой проблеме. [c.18] Ход гидролитического процесса можно контролировать рядом методов, из которых отметим следующие. [c.19] Нефелометрический метод основан на измерении степени мутности раствора, при чем начальную мутность сравнивают с последующей, изменяющейся в ходе процесса. Растворы протеинов в воде при коагуляции образуют мутные взвеси. При гидролитическом расщеплении степень мутности при коагуляции изменяется. [c.19] если взять раствор белка в воде и коагулировать его определенным образам, получается начальная степень мутности прибавив затем в другую порцию раствора протеина фермент (например пепсин) и произведя по истечении некоторого времени и в атом растворе коагуляцию, сравнивают его при помощи особого прибора — нефелометра с первой коагулированной пробой. Ведя аналогично наблюдения над последующими пробами, подвергшимися различному по времени воздействию фермента, можно по изменении мутности проследить ход гидролитического расщепления протеина. [c.19] Нефелометр Клейн-ыана. [c.19] Вернуться к основной статье