ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Подготовка растворителей из "Аналитическая хроматография" Рассмотрим некоторые практические приемы, которые можно рекомендовать для повышения надежности работы хроматографической системы. [c.310] Фильтрование. Основной фильтр подвижной фазы, имеющийся в каждом приборе, расположен во всасывающей линии насосной системы. Для нормальной работы насосов необходимо, чтобы сопротивление всасывающей линии было минимальным, в противном случае при всасывании возможно образование пузырей пара и нарушение работы клапанов. Поэтому используемые фильтры имеют довольно большую поверхность. Для улучшения работы насоса иногда рекомендуют размещать резервуары с подвижной фазой на несколько десятков сантиметров выше насоса. С течением времени фильтры засоряются, их сопротивление нарастает, возрастает вероятность нарушений работы насоса. Чтобы продлить срок непрерывной службы встроенного в прибор фильтра, можно рекомендовать предварительное фильтрование всех растворителей, помещаемых в резервуар, через материалы с размером пор 2—5 мкм. [c.310] Оценить состояние всасывающего фильтра хроматографа можно следующим образом. К выходу насоса присоединяют отрезок капилляра длиной 40—60 см и, внутренним диаметром 0,25—0,5 мм. Конец капилляра размещают на 40—60 см ниже уровня подвижной фазы в резервуарах. Засасывают (с помощью, вакуума, шприца, резиновой груши) в капилляр жидкость из резервуара. После отсоединения источника вакуума при остановленном насосе подвижная фаза должна продолжать самотеком вытекать из капилляра со скоростью не менее 0,5 мл/мин. Меньшая скорость свидетельствует о засорении фильтра. [c.310] Для очистки фильтра можно рекомендовать следующую процедуру. Фильтр отсоединяют от системы и продувают сжатым воздухом в направлении, противоположном рабочему. Затем помещают в стакан, заливают ацетоном и устанавливают стакан в ультразвуковую ванну. Черёз 10 мин ацетон заменяют дистиллированной водой, затем 30%-й азотной кислотой. После 10-минутной выдержки в ультразвуковой ванне фильтр отмывают от азотной кислоты дистиллированной водой до pH 5. После этого фильтр готов к использованию в водных растворителях. Для работы с органическими подвижными фазами продолжают промывку два раза ацетоном или спиртом, затем два раза подвижной фазой. [c.310] Повторное использование растворителей. Чаще всего подвижную фазу использую однократно. Однако такая практика не оправдана нн экономически, ни экологически, ни даже с точки зрения хроматографии как таковой. Можно предложить два пути повторного использования растворителей — регенерацию и рециркуляцию. При регенерации элюат после детектора собирают и порциями подвергают перегонке. В результате получают смесь растворителей, несколько отличающуюся от первоначального элюата. Проанализировав ее (например, методом ГЖХ), можно рассчитать, сколько и какого растворителя необходимо добавить чтобы получить подвижную фазу первоначального состава. Ясно, что регенерация позволяет избавиться от всех нелетучих примесей, и поэтому ее следует использовать преимущественно для подготовки элюентов для препаративной ВЭЖХ. [c.311] Соли и буферные растворы. В состав подвижных фаз помимо воды и органических растворителей могут входить также неорганические соли или ион-парные агенты. Они являются источником дополнительных примесей в подвижной фазе. Так, ион-парные агенты могут содержать органические соединения, для удаления которых подвижную фазу предварительно пропускают через колонку с октадецилсиликагелем. [c.312] Фосфатные буферные растворы могут служить средой для размножения микроорганизмов,, поэтому их рекомендуется хранить в холодильнике. По этой же причине не следует оставлять неработающие колонки в контакте с этими растворами. [c.312] Нержавеющая сталь, из которой изготавливают почти все детали хроматографического оборудования, вполне устойчива в контакте с подавляющим большинством буферных растворов и солей, применяемых в ВЭЖХ. Исключение составляют формиаты и галогениды, обладающие заметной коррозионной активностью. [c.312] При приготовлении подвижных фаз для ион-парной, обращенно-фазовой или ионообменной хроматографии получение необходимой молярной концентрации компонентов не вызывает затруднений, в то время как установка необходимого значения pH водноорганических элюентов может быть связана с затруднениями. В связи с этим принято указывать значения pH не для элюента в целом, а для его водной части, до смешения с органическим растворителем. Следует иметь в виду, что прибавление к водному буферному раствору органического растворителя может увеличить кажущееся значение pH на Г—2 единицы, в результате чего смешанный водно-органический элюент станет довольно агрессивным по отношению к химически модифицированным силикагелям. [c.312] Вернуться к основной статье