ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение примеси салициловой кислоты в ацетилсалициловой методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) из "Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств" Газовая хроматография в последние годы получила широкое развитие в фармацевтическом анализе благодаря тому, что позволяет одновременно разделить анализируемую смесь и определить входящие в ее состав вещества количественно. [c.223] Газовая хроматография — это хроматография, в которой подвижная фаза, содержащая определяемые компоненты, находится в состоянии газа или пара. В фармацевтическом анализе применяется как газожидкостная (ГЖХ), так и газоадсорбционная (ГАХ) хроматография. В ГЖХ неподвижной фазой служит жидкость, нанесенная на твердый носитель, в ГАХ — твердый адсорбент. Анализируемые вещества вводятся в поток газа-носителя, испаряются в испарителе и в парообразном состоянии проходят через колонку с сорбентом, разделяясь на отдельные компоненты. Разделенные вещества элюируются из колонки газом-носителем, регистрируются детектором и фиксируются на хроматограмме в виде пиков. Полученная хроматограмма служит основой для качественного и количественного анализа смеси веществ. [c.223] Метод газовой хроматографии применяется для оценки доброкачественности лекарственных средств, так как позволяет выделить и одновременно определить количественно содержание в них примесей для количественного определения индивидуальных лекарственных веществ в смеси для определения подлинности и количественного содержания лекарственных веществ, входящих в состав сложных лекарственных форм для определения содержания воды и летучих веществ в лекарственных средствах для определения консервантов, входящих в состав лекарственных форм для определения этанола в спиртсодержащих лекарственных формах и т. д. [c.223] Системы термостатирования и контроля температуры колонов детектора, узда ввода пробы предназначены для обеспечения не обходимых температурных режимов анализа. [c.224] Качественный анализ. Наиболее используемыми методами кг чественного анализа, применяемыми для идентификации лека ственных веществ, являются метод веществ-свидетелей и мето относительных удерживаний. [c.224] Количественный анализ. Количественный анализ проводят с учетом измерения параметров пиков веществ на хроматограммах. Практически используют два параметра пиков площадь или высоту. Наиболее часто применяемым параметром является площадь пика. [c.225] Площади пиков на хроматограмме определяют одним из следующих способов умножением высоты пика (Ь) на его ширину ( Х(,д), измеренную на половине его высоты планиметрированием с помощью интегратора. В связи с тем, что чувствительность детекторов по отношению к разделяемым веществам, как правило, неодинакова, в необходимых случаях количественному определению предшествует градуировка прибора. [c.225] Существуют три основных метода количественного анализа метод абсолютной градуировки, метод внутренней нормализации и метод внутреннего стандарта. [c.225] Метод абсолютной градуировки основан на предварительном определении зависимости между количеством введенного вещества и площадью или высотой пика на хроматограммах. В хроматограф вводят известное количество градуировочной смеси и определяют площади или высоты полученных пиков. Строят график зависимости площади или высоты пика от количества введенного вещества. Анализируют исследуемый образец, измеряют площадь или высоту пика определяемого компонента и на основании градуировочного графика рассчитывают его количество. [c.225] Метод внутренней нормализации основан на приведении к 100 % суммы площадей пиков на хроматограмме. [c.225] Метод внутреннего стандарта основан на сравнении выбранного определяющего параметра пика анализируемого вещества с тем же параметром вещества сравнения, введенного в пробу в известном количестве. В исследуемую пробу вводят известное количество такого вещества сравнения, пик которого достаточно хорошо разделяется с компонентами исследуемой смеси. Проводят анализ пробы с веществом и рассчитывают количество определяемого вещества. [c.225] ВЭЖХ (жидкостная хроматография высокого давления) является вариантом колоночной жидкостной хроматографии, в которой выдвижная фаза — элюент — проходит через заполняющий колонку. сорбент с большой скоростью за счет значительного давления на входе в хроматографическую колонку. [c.226] ВЭЖХ — удобный способ разделения, препаративного выделения и проведения количественного и качественного анализа нелетучих термолабильных соединений как с малой, так и с большой молекулярной массой. [c.226] Объектом исследования является ацетилсалициловая кислота (фармакопейная). [c.226] Работу проводят на жидкостном хроматографе Милихром . Хроматографическая колонка из нержавеющей стали длиной 62 мм с внутренним диаметром 2 мм заполнена сорбентом с обращенной фазой g или jg (силикагель с привитыми гидрофобными группами). Плотная упаковка частиц адсорбента малого размера (5 мкм) в колонке позволяет получить высокоэффективное хроматографическое разделение компонентов смеси. [c.226] Насос высокого давления обеспечивает подачу элюента в колонку с заданной постоянной скоростью. [c.226] В качестве детектора используют микроспектрофотометр с переменной (190—900 нм) длиной волны. [c.226] Работу начинают с приготовления раствора ацетилсалициловой кислоты в этаноле с концентрацией 4 мг/мл и раствора салициловой кислоты в этаноле с концентрацией 1 мг/мл. Задают программу хроматографирования (длину волны, чувствительность. [c.226] Хроматографирование раствора ацетилсалициловой кислоты проводят не менее 3 раз, затем проводят хроматографирование раствора салициловой кислоты, предварительно отобрав его иглу так же, как ацетилсалициловую. [c.227] Вернуться к основной статье