ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Испытание на содержание веществ гистаминоподобного действия из "Физико-химические и биологические методы оценки качества лекарственных средств" Испытание проводят на здоровых кроликах обоего пола, не альбиносах, массой 2—3,5 кг, содержавшихся на полноценном рационе. Каждый кролик должен находиться в отдельной клетке в помещении с постоянной температурой. Колебания температуры не могут превышать 4—3 °С. При уборке клеток и взвешивании животных их оберегают от возбуждения (избегать шума и резких движений). [c.305] Если нет других указаний в частной статье, для испытанш отбирают не менее 2 флаконов или ампул от каждой серии, содер жащей от 1000 до 10 ООО флаконов или ампул. При количестве 1 серии флаконов или ампул более 10 ООО отбирают по 3 флакон или ампулы от каждой серии. Из отобранных флаконов или ам пул готовят общий раствор (смешанная проба). От серии, содер жащей до 1000 флаконов или ампул, для испытания отбирают п 1 флакону или ампуле. [c.306] Последующее измерение температуры при внутривенном введении испытуемого раствора проводят 3 раза с промежуткгими в 1 ч. При других путях введения — 5 раз с промежутками в 1 ч, если в частной статье нет других указаний. [c.307] В частной фармакопейной статье могут быть указаны другие пределы отклонения температуры. [c.307] Если в частной статье на лекарственное средство нет других указаний, случаи понижения температуры у кроликов принимают за нуль. [c.307] Кролики, бывшие в опыте, могут быть использованы для определения пирогенности повторно, но не ранее, чем через 3 сут, если введенный им до этого раствор лекарственного средства или вода для инъекций были непирогенными. Если же введенный раствор лекарственного средства или вода для инъекций оказались пирогенными, кролики могут быгь использованы для дальнейших опытов через 2 недели. При повышении температуры у кроликов в подобных случаях на 1,2 С и более они используются через 3 недели. Если исследуемые вещества обладают антигенными свойствами, то одних и тех же кроликов нельзя использовать для испытания повторно (если нет специальных указаний в частной статье) [11]. [c.307] ЛАЛ-тест для определения пирогенности лекарственных препаратов является активно развивающимся в настоящее время способом контроля качества лекарств, воды для инъекций. Он может быть использован и в медицине для ранней диагностики заболеваний, вызванных грамотрицательными бактериями, и в некоторых других областях, где необходимо быстрое обнаружение грам отрицательных бактерий или их эндотоксинов. [c.308] В основе этого метода лежит способность лизата амебоцитоЕ (клеток крови) мечехвоста специфически реагировать с эндотоксинами грамотрицательных бактерий — липополисахаридами (ЛПС). В результате реакции эндотоксина и лизата происходит помутнение прозрачной реакционной смеси или образование твер дого геля, что и служит индикатором присутствия эндотоксина. Реакция проста, и для ее реализации не требуется много времени ответ может быть получен через 30—60 мин. Тест высокоспецифичен по отношению к эндотоксинам грамотрицательных бактерий. Чувствительность его во много раз превышает чувствительность фармакопейного теста на кроликах. [c.308] Сырьем для производства ЛАЛ-реагента служит кровь мечехвостов — морских животных, обитающих у берегов Северной Америки, Японии, Китая, Вьетнама, Индии. Готовый препарат представляет собой сублимационно высушенный лизат клеток крови (амебоцитов) после разведения его апирогенной водой готов к использованию. [c.308] Реакция лизата амебоцитов с эндотоксином была открыта в США в 1964 г., где и был налажен выпуск первых коммерческих препаратов. [c.308] НИИ ЛАЛ-тест, безусловно, дешевле теста на кроликах. Область применения этого метода по сравнению с определением на кроликах значительно шире создается возможность для определения пирогенности лекарств, которые нельзя было испытать на кроликах — короткоживущих изотопов, препаратов седативного действия и др. проводится определение эндотоксинов в крови и других биологических жидкостях организма, что расширяет возможности ранней диагностики инфекционных заболеваний, вызываемых грамотрицательными микроорганизмами анализируется чистота медицинских аппаратов, соприкасающихся с кровью пациента, проводится постадийный контроль содержания ЛПС в производстве инъекхщонных препаратов. [c.309] В настоящее время ЛАЛ-тест узаконен фармакопеями США, Италии, Китая, Европейской фармакопеи и др. В РФ 15.09.97 г. введена временная фармакопейная статья ВФС 42-2960—97 Определение содержания бактериальных эндотоксинов (ЛАЛ-тест) , разработан проект общей статьи для Фармакопеи XII Испытание на пирогенность . В основе метода определения по ВФС 42-2960—97 в инъекционных препаратах содержания бактериальных эндотоксинов лежит процесс физико-химического взаимодействия эндотоксинов с лизатом клеток (амебоцитов) крови мечехвостов, в результате которого происходит образование геля. [c.309] Для определения содержания бактериальных эндотоксинов в препаратах допускается использование различных модификаций ЛАЛ-теста, если они приведены в частной фармакопейной статье. [c.309] ЛАЛ-тест — это наиболее современное средство оценки содержания бактериальных эндотоксинов в инъекционных лекарственных средствах. Изучение механизма реакции гелирования, особенно взаимодействия эндотоксина с эндотоксинчувствительным фактором ЛАЛ-реактива, поможет более глубокому пониманию свойств эндотоксина, его биологической активности. [c.309] ЛАЛ-тест поднимет контроль качества лекарств на новую, более высокую ступень. [c.309] Для проведения ЛАЛ-теста необходимы ЛАЛ-реактив, рабочий стандартный образец (РСО) эндотоксина и вода для ЛАЛ-теста. [c.309] Стандарт эндотоксина. В качестве РСО эндотоксина используется препарат эндотоксина, оттитрованный фирмой-производи-телем по Американскому национальному стандарту эндотоксина RSE. [c.310] Содержание эндотоксина выражается в единицах эндотоксина (ЕДэ). [c.310] Эндотоксин, включенный в набор для анализа по ЛАЛ-тесту, может быть в виде раствора или в виде сублимационно высушенного вещества. В последнем случае его разводят водой для ЛАЛ-теста в соответствии с указаниями фирмы-производителя. [c.310] Вернуться к основной статье