ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Окраска клеток микроорганизмов по Граму из "Практикум по микробиологии" Техника окраски по Граму. На хорошо обезжиренное предметное стекло наносят три тонких мазка разных культур микроорганизмов (два из них — контрольные с заведомо известным отношением к окраске по Г раму). Мазки высушивают на воздухе, фиксируют над пламенем горелки и окрашивают в течение 1 мин феноловым раствором генциана фиолетового (или кристаллическое го фиолетового), держа стекло в несколько наклонном положении. Сливают краситель и, не промывая препарат водой, наносят на него раствор Люголя на 1 мин (до полного почернения мазка). Стекло и в этом случае лучше держать в наклонном положении. Препарат (не промывая водой) обрабатывают, непрерывно покачивая, 96%-ным спиртом в течение 15—20 с. Время обесцвечивания очень существенно, при превышении определенного срока обесцвечиваются и грамположительные клетки, при недостаточном сроке обработки препарат окажется перекрашенным в дальнейшем. [c.42] Промыв препарат водой, его окрашивают фуксином Пфейфера в течение 1 мин. Грамположительные микроорганизмы окрашиваются в темно-фиолетовый цвет, грамотрицательные — имеют только цвет дополнительной окраски (фуксина). [c.42] Метод Грама в модификации Синева. На фиксированный мазок накладывают полоску фильтровальной бумаги шириной 3 см, предварительно пропитанную 1%-ным спиртовым раствором кристаллического фиолетового и высушенную (в высушенном виде бумага может долго храниться). На бумагу наносят 2—3 капли воды и оставляют ее на препарате 2 мин. [c.42] Метод Грама в модификации Калины. На предметное стекло наносят небольшую каплю дистиллированной воды, вносят в нее минимальное количество клеток микроорганизмов и петлей добавляют 0,5%-ный спиртовой раствор кристаллического фиолетового. Суспензию равномерно распределяют на площади 1 см , подсушивают и фиксируют однократным проведением над пламенем Горелки. После этого препарат в течение 1 мин обрабатывают реактивом, содержащим 10 мл 5%-ного раствора фуксина Пфейфера, 10 мл 10%)-ного раствора йода, 10 мл ацетона и 70 мл 0,5%-ного раствора йодистого калия. Затем препарат опускают на одно мгновение в этиловый спирт (96%-ный) и быстро высушивают фильтровальной бумагой. [c.43] Рецепты красителей и вспомогательных растворов для окраски по граму. 1. Феноловый раствор генциана фиолетового геициаи фиолетовый—I г, спирт 96%-иый—10 мл, феиол кристаллический — 2 г, вода дистиллированная — 100 мл. [c.43] Вернуться к основной статье