ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Окраска жгутиков из "Практикум по микробиологии" Жгутики микроорганизмов — тончайшие образова-ния (0,02 — 0,04 мкм), легко отрывающиеся от клетки при обработке. Это затрудняет их исследование. В основе методов окрашивания жгутиков лежит обработка их протравителями, в результате которой они увеличиваются в объеме. [c.47] Подготовка материала. Подготовку культуры ведут за несколько суток до просмотра. Рекомендуется ежедневно несколько дней подряд делать пересевы на свежую питательную среду (в жидкую среду или в конденсационную воду свежей скошенной агаризованной среды). Кроме того, в день просмотра можно брать петлей материал и переносить в пробирку с 5—6 мл стерильной водопроводной воды, нагретой до 37°С. Не рекомендуется болтать петлей в воде, бактериальная масса сама должна в течение 30—60 мин разойтись в ней. Прежде чем приступать к работе, необходимо проверить подпиж- ность клеток в висячей капле. В случае отсутствия подвижности следует оставить пробирку в термостате на 17г—2 суток. [c.47] Для приготовления препаратов необходимы совершенно чистые предметные стекла. Их кипятят в растворе двухромовокалиевой соли в крепкой серной кислоте, затем дважды промывают в растворе едкого натра. После этого стекла промывают водой и помещают для хранения в банку с 96%-ным спиртом. Перед приготовлением мазка следует сильно нагреть ту сторону стекла, на которую будет нанесен мазок, но наносят его на охлажденное стекло. [c.47] Окрашивают препарат 3—4 мин при легком нагревании (до появления пара) карболовым фуксином Циля либо раствором, содержащим 1 часть насыщенного спиртового раствора фуксина в 10 частях воды. Затем препарат промывают водой, высушивают и исследуют под микроскопом с иммерсией. Жгутики и клетки бактерий окрашиваются в розовый цвет. [c.48] Реактив получают, смешивая I мл раствора I с 10 мл раствора 2, н к смеси прибавлиют 5,5 мл раствора 3. Лучшие результаты дает смесь, выдержанная 2—3 дня. Действие смесн можио улучшить, добавляя на каждые 10 мл по 0,1—0,2 мл 1 н. раствора КаОН. [c.48] Метод Лейфсона. Карандашом для стекла на одной половине стекла по границе вычерчивают прямоугольник. Петлей наносят суспензию бактерий на площадь прямоугольника. Наклоняя стекло, дают возможность стечь избытку жидкости на противоположную сторону. Препарат сушат при комнатной температуре на воздухе. [c.48] Ц1ИЙ в осадок краситель). Если клетки бактерий не окрасились в красный цвет, их докрашивают метиленовым синим. [c.49] Метод серебрения жгутиков по Морозову. Готовят три реактива 1) 1 мл ледяной уксусной кислоты, 2 мл формалина, 100 мл дистиллированной воды 2) 5 г танина, 1 мл жидкой карболовой кислоты (феиола), 100 мл дистиллированной воды 3) 5 г кристаллического азотнокислого серебра (AgNOз) растворяют в 100 мл дистиллированной воды. [c.49] К 80 мл раствора серебра (20 мл отливают) по каплям приливают водный раствор аммиака (нашатырного спирта), пока не растворится образовавшийся осадок и останется легкая опалесценция. Если аммиака будет добавлено слишком много, то из отлитых в другой сосуд 20 мл раствора серебра надо по каплям приливать раствор до получения нужной опалесценции. Для окраски препарата раствор серебра разводят дистиллированной водой в соотношении 1 100. Техника окраски следующая на одну минуту на препарат наливают первый реактив, сливают, промывают водой, наливают второй реактив, подогревают на слабом пламени до появления паров (1 мин), тщательно промывают водой, 1—2 мин пр И подогревании обрабатывают препарат третьим реактивом до появления темно-коричневой окраски мазка, тщательно промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсией. [c.49] Окраска жгутиков относится к числу наиболее тон ких методов исследования строения микробной клетки, поэтому для практических занятий лучше воспользоваться заранее приготовленными, наиболее удачными препаратами. [c.49] Вернуться к основной статье