ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Значение отдельных питательных элементов из "Практикум по микробиологии" В состав клеток микроорганизмов входят органогены (С, О, Н, N), зольные элементы (Р, S, К, Mg, Са, Fe) и микроэлементы, которые в малых дозах стимулируют рост клеточной массы, а в больших тормозят его. К ним относятся Zn, Мп, В, Си, Мо, Со и др. [c.53] В сухом веществе клеток содержится углерода — 50%, азота—10—13, водорода — 8, кислорода — 20, РаОв —4, К2О —3, SO3—1, MgO —0,8, СаО—1, РеаОз — 0,08%, микроэлементов — следы. [c.53] Готовят несколько вариантов питательных сред, из которых один — полная питательная среда без микроэлементов Aspergillus niger развивается на этой среде хорошо), все остальные — та же среда с исключением того или иного элемента или с добавлением микроэлемента. [c.53] По росту гриба на питательных средах судят о значении исключаемого элемента или добавленного микроэлемента для развития гриба. [c.53] Перед составлением питательных сред нужно рассчитать эквивалент — процент тех солей, которые вводят вместо исключаемых. [c.54] Таким образом, для определения эквивалентного процента замещающей соли ( 7) в нашем опыте нужно молекулярную массу ее умножить на процент заменяемой соли и разделить на молекулярную массу последней. [c.54] При постановке опыта для каждого варианта рассчитывают количество всех веществ в граммах на 30 мл среды. Так как Aspergillus niger — аэробный организм, то опыт ставят в колбах Эрленмейера емкостью 75— 100 мл. [c.55] Подобным образом рассчитывают все ингредиенты для каждого варианта в миллилитрах и вносят в колбу. Далее миллилитры суммируют и вычитают из 30 мл. Полученная разность показывает, сколько дистиллированной воды надо добавить. [c.55] Все необходимые соли и сахарозу вносят тщательно отмытыми пипетками (сначала их моют под струей водопроводной воды, затем споласкивают дистиллированной водой). [c.55] Целые миллилитры вносят градуированной пипеткой на 10 мл с делениями 0,1 мл, а десятые и сотые доли — микропипеткой на 1 мл с делениями 0,01 мл. [c.55] Среды перед внесением спор гриба не стерилизуют, так как высокая концентрация сахара и кислая реакция (за счет кислой соли КН2РО4) будут препятствовать росту бактерий. Каждый вариант желательно ставить в двукратной повторности. Опытные колбы помещают в термостат при 28—30°С. [c.55] Спустя 7 суток проводят анализ опыта. Выросшую пленку в первом варианте берут за стандарт. Обычно в этом варианте рост гриба хороший (пленка мощная). С первым вариантом сравнивают все остальные. Оценка роста гриба визуальная. [c.56] Для более точной оценки роста гриба в каждом ва--рианте пленки его можно высушить при 105°С до постоянной массы. Первый вариант принимается за 100%. [c.56] На средах с исключением того или иного элемента (особенно если в нем большая потребность) гриб не растет (или растет очень слабо). Если элемент требуется в очень небольших количествах (например, FeSO — 0,01%), то исключение его мало сказывается на росте клеточной массы, так как гриб использует примеси этого элемента в реактивах. При полном выделении из питательной среды необходимого элемента гриб развиваться не будет. [c.56] Вернуться к основной статье