ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Изолирование подкисленным спиртом из "Токсикологическая химия Изд.3" Методы изолирования подкисленным спиртом и подкисленной водой являются общими методами изолирования для всех перечисленных выще веществ. [c.120] Принцип изолирования алкалоидов подкисленным спиртом (метод Стаса—Отто). Извлечение тех или иных веществ, в частности из объектов биологического происхождения, основано на различной растворимости этих веществ в воде и органических растворителях (если вещество извлекается из смеси с другими твердыми веществами) и на законе распределения веществ между двумя несмешивающими жидкостями (если вещество экстрагируется из раствора в какой-либо жидкости). [c.120] Принцип изолирования подкисленным спиртом впервые предложен для алкалоидов в 1851 г. известным бельгийским химиком Стасом и сводился к извлечению алкалоидов в виде их виннокислых или щавелевокислых солей этиловым алкоголем, выпариванию последнего на водяной бане при температуре 35°, обработке водой для удаления жиров, смол, красящих, дубильных и других веществ, а затем к экстрагированию оснований алкалоидов эфиром. [c.120] В 1856 г. Юлий и Роберт Отто ввели в метод Стаса еще одну операцию — очистку остатка, исследуемого на алкалоиды, путем экстрагирования различного рода примесей эфиром из кислой жидкости. [c.120] В дальиепщем было замечено, что не все алкалоиды одинаково относятся к различным органическим растворителям. Это дало повод разным авторам рекомендовать для экстрагирования алкалоидов, кроме эфира, уксусноэтиловый эфир (для морфина), хлороформ, бензин (для стрихнина), смесь хлороформа со спиртом, амиловый и бутиловый спирты и некоторые другие органические растворители, а для отделения сопутствующих алкалоидам веществ — хлороформ, бензол, петролемный эфир и другие растворители. [c.120] Современная модификация метода извлечения подкисленным спиртом сводится к следующему. Тщательно пзмсльчсиныи объект (100—200 г внутренних органов, трупа) помещают в толстостенную колбу или банку, заливают 96° этиловым спиртом так, чтобы были покрыты твердые части объекта, и подкисляют Ю Уо спиртовым раствором виннокаменной (или щавелевой) кислоты. [c.121] Когда исследуемый объект подкислен, колбу, не закрывая пробкой, встряхивают и спустя некоторое время (в неводных растворах и в гетерогенной среде время нейтрализации больше,, чем в воде) содержимое испытывают реакцией па универсальный индикатор. Для этого каплю жидкости смешивают с каплей воды нейтральной реакции и смесью смачивают индикаторную бумагу — pH среды должен быть 2,5—3,0. [c.121] Пробирку закрывают неплотно (имеется в виду возможность продолжения выделения некоторого количества угольного ангидрида), оставляют колбу на сутки в теплом месте (25—30°), часто перемешивая ее содержимое. Спустя сутки убеждаются в сохранении кислой реакции. Тогда спиртовую вытяжку сливают и заменяют новой порцией спирта. Если через сутки реакция жидкости изменилась, стала нейтральной или щелочной, объект вновь подкисляют органической кислотой до pH 2,5—3,0 и снова оставляют на сутки. Операцию извлечения проводят 3—4 раза. [c.121] Спиртовые вытяжки соединяют вместе, а биологический материал промывают спиртом. Спирт присоединяют к слитым ранее порциям вытяжек. Извлечения отфильтровывают и сгущают до густоты сиропа под уменьшенным давлением или в фарфоровой чашке на водяной бане, имеющей температуру воды не выше 40° (во избежание разрушения таких веществ, как атропин, кокаин, и некоторых других соединений, имеющих характер сложных эфиров). Сиропообразную жидкость обрабатывают 96°, а еще лучше абсолютным спиртом, приливая его по каплям и перемешивая жидкость стеклянной палочкой. Спирт добавляют до тех пор, пока не прекратится осаждение белков. [c.121] Осторожное добавление спирта вызывает осаждение белковых веществ в виде мелких хлопьев, не захватывающих раствора, что может иметь место при добавлении большого количества спирта сразу, когда осадок выделяется в виде больших сгустков. [c.121] За рубежом в последнее время предлагается изолирование спиртом (без соблюдения pH среды) проводить 1 час на водяной бане при 60°. [c.121] Упрощенной моделью могут служить две соответствующего размера колбы Вюрца. Отводящая трубка одной колбы вставлена при помощи каучуковой пробки в другую, отводящая трубка последней колбы соединяется через предохранительную склянку с водоструйным насосом. [c.121] Жидкость отстаивают, фильтруют, фильтр промывают спиртом и фильтрат упаривают до густоты сиропа при описанных выше условиях. В сиропообразном остатке снова осаждают белки, жидкость отстаивают и фильтруют. Операцию осаждения белков повторяют до тех пор, пока спирт перестанет что-либо осаждать. Тогда вытяжку упаривают до густоты сиропа и обрабатывают 20—25 мл воды. Если при этом образуется осадок, его отфильтровывают и тщательно промывают небольшим количеством воды. [c.122] Из водного раствора производят повторные извлечения (3—4 раза) небольшими порциями (по 10—15 мл) хлороформа сначала из кислой, а затем из щелочной (pH 10) среды. Подще-лачивание производят 25% раствором аммиака. [c.122] Удобство применения хлороформа в качестве растворителя заключается в том, что он достаточно хорошо растворяет большинство токсикологически важных органических веществ из группы изолируемых подкисленным спиртом и легко отделяется от водного раствора. [c.122] Извлечение как из кислой, так и из щелочной жидкости должно производиться осторожно, лишь легким взбалтыванием или многократным перевертыванием делительной воронки, но отнюдь не энергичными встряхиваниями. Последние могут вызвать образование трудноразделимой эмульсии. Образовавшуюся эмульсию можно попытаться разрушить, добавив 0,5—1 мл спирта и поставив объект исследования в теплое место. Расслоение достигается при насыщении жидкости сульфатом аммония. Лучшим способом является центрифугирование. [c.122] Экстрагированием хлороформом сначала из кислого, а затем из щелочного раствора преследуется цель разделения веществ, изолируемых подкисленным спиртом, на две большие подгруппы 1) подгруппа веществ, экстрагируемых хлороформом из кислого раствора 2) подгруппа веществ, экстрагируемых хлороформом из щелочного раствора. [c.122] Экстрагирование хлороформом из кислого водного раствора, кроме того, ставит своей задачей очистку жидкости от жира, красящих, дубильных и других веществ, мешающих дальнейшему качественному обнаружению алкалоидов и других токсикологически важных веществ основного характера. [c.122] Из числа веществ, представляющих токсикологический интерес, хлороформ экстрагирует из кислого раствора 1) кислоты и их производные 2) многоатомные фенолы 3) некоторые вещества нейтрального характера (полинитросоедииения), производные анилина и парааминофенола 4) слабые основания. [c.122] Все хлороформные извлечения из кислого раствора сливают вместе, фильтруют через возможно маленький фильтр и отдель -ные порции исследуют на наличие производных барбитуровой кислоты и таких слабых оснований, как стрихнин, бруцин, кофеин и др. [c.122] Вернуться к основной статье