ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Хроматография на бумаге из "Техника лабораторной работы в органической химии" Частным случаем описанного выше способа распределительной хроматографии является хроматография на бумаге, или бумажная хроматография. При этом неподвижной жидкой фазой обычно служит вода, адсорбированная волокнами фильтровальной бумаги в количестве до 18—22%, или же другой полярный растворитель в качестве подвижной фазы чаще всего применяют растворители полярного характера, например бутиловый спирт, бензиловый спирт, коллидин, фенол, крезолы или их смеси (см. ниже). Носителем неподвижной жидкой фазы служит специальная бумага для хроматографии или обычная фильтровальная бумага хорошего качества, достаточно однородная по толщине и плотности. [c.300] Техника бумажной хроматографии состоит в следующем каплю (или несколько капель) исследуемого раствора наносят на определенное место куска фильтровальной бумаги проявляющий растворитель равномерно движется по бумаге вследствие капиллярных сил в одном направлении без потерь за счет испарения при этом вещества, входящие в состав исследуемой смеси, перемещаются по бумаге в том же направлении с различной скоростью, образуя отдельные зоны или пятна. Процесс истинной адсорбции веществ на волокнах целлюлозы также играет здесь не малую роль. [c.300] Известны разные способы осуществления бумажной хроматографии, характеризующиеся той или иной техникой выполнения восходящая хроматография, нисходящая хроматография, в том числе одномерная (линейная) и двухмерная, хроматография кольцевая, или радиальная. [c.301] При применении линейного способа хроматографирования на полоску фильтровальной бумаги шириной 15—30 мм и длиной 300—500 мм наносят одну или несколько капель исследуемого раствора на расстоянии 30—40 мм от конца. Можно нанести раствор каплями в одну точку или же в виде полоски по всей ширине бумажной ленты. При этом следует помнить, что нельзя касаться пальцами той части бумаги, на которой будет происходить процесс хроматографирования. [c.301] Подготовленную таким образом бумажную ленту погружают одним концом (тем, вблизи которого был нанесен раствор смеси веществ) в проявлякйций растворитель и весь прибор помещают в герметическую камеру, атмосфера которой насыщена парами данного растворителя и воды. Для восходящей линейной хроматографии на бумаге удобно пользоваться простым прибором, изображенным на рис. 191. Он состоит из стеклянного цилиндра, закрытого пробкой с изогнутой стеклянной палочкой, на которой подвешивают бумаж ную полосу 2. Нижний конец полосы погружают в насыщенный водой проявляющий растворитель 3, налитый на дно цилиндра. Важно, чтобы края бумажной полосы не касались стенок цилиндра, для чего иногда рекомендуют сделать на полосе продольный сгиб (не касаясь бумаги пальцами). [c.301] Если желательно применить способ нисходящей хроматографии, то в верхней части герметически закрываемой камеры помещают лодочку с растворителем и погружают в него конец бумажной полосы, которую изгибают, опуская ее вниз. В этом случае исследуемый раствор наносят на полосу ниже места ее изгиба. [c.301] Для характеристики различия в скорости движения веществ, входящих в состав хроматографируемой смеси, обычно приводят величину Rp которая представляет собой отношение длины пути, пройденного данным веществом, начиная от места нанесения до переднего края пятна (зоны), к расстоянию, пройденному фронтом растворителя. Однако нуЖно иметь в виду, что абсолютное значение этой величины может довольно широко варьировать в зависимости от многих факторов температуры, состава растворителя, качества бумаги, длительности хроматографирования и др. Поэтому использование одной лишь величины, Rf для целей идентификации мало целесообразно. [c.302] Если возможно, то лучше осуществлять хроматографирование со свидетелями . Для этого на одной полосе бумаги, рядом с местом нанесения исследуемого раствора, помещают по одной или по несколько капель растворов чистых веществ, предположительно входящих в состав исходной смеси, и после хроматографирования наглядно сравнивают расположение полученных пятен (зон). Естественно, что данный прием требует применения соответственно более широкого куска фильтровальной бумаги и, следовательно, более широкого герметического сосуда для проявления хроматограммы. Если в распоряжении экспериментатора имеется лишь цилиндрический сосуд, диаметр которого меньше ширины бумаги для хроматографирования со свидетелями, то можно вести процесс на бумаге, свернутой в спиральный цилиндр, как показано на рис. 192. Разумеется, при этом бумага должна быть достаточно плотной. [c.302] Еще лучшего разделения компонентов сложных смесей удается достичь при помощи двухмерной хроматографии. В этом случае также применяют не полоски фильтровальной бумаги, а прямоугольники с длиной стороны примерно 300—500 мм. Исследуемый раствор наносят вблизи одного из углов прямоугольника и хроматограмму проявляют дважды сперва одним растворителем, а затем, после высушивания и поворота на 90°,—другим. [c.302] ДЛЯ подвешивания после хроматографирования. В центральное отверстие вставляют скрученный из фильтровальной бумаги фитиль длиной 1,5—2 см. На точки вокруг фитиля наносят растворы исследуемой смеси и контрольных веществ ( свидетелей ) и кладут бумагу на круглый плоский сосуд с растворителем так, чтобы фитиль был в него погружен. Весь прибор помещают в камеру того же формата. Проявляющий растворитель поднимается по фитилю и равномерно распространяется по фильтровальной бумаге, образуя фронт в виде окружности и зоны соответствующей формы (рис. 193, б). [c.303] Для проявления хроматограммы на бумаге обычно применяют полярные растворители, насыщенные водой, или их смеси. Наиболее употребительны растворители, приведенные в табл. 96. [c.303] Разумеется, указанные в таблице соотношения могут быть при необходимости изменены. [c.303] Если вещества, подвергаемые хроматографированию на бумаге, бесцветны, то для обнаружения образовавшихся зон следует, после высушивания хроматограммы, применить соответствующий реагент, раствором которого обрызгивают бумагу при помощи пульверизатора. В случае хроматографирования смеси аминокислот обычно применяют нингидрин, вещества кислотного или основного характера обнаруживают соответствующим индикатором, иногда пользуются разбавленным раствором перманганата и т. п. Нередко лучшие результаты можно получить при рассматривании хроматограммы в ультрафиолетовом свете. [c.303] Пиридин—я-бутанол—вода. . [c.304] Этилацетат—пиридин—вода. [c.304] Метилэтилкетон—пиридин—вода. . . Изомасляная кислота—уксусная кислота—вода. . [c.304] Изомасляная кислота—вода. . [c.304] МОСТИ ОТ величины молекулярного веса. Чем больше молекулярный вес, тем быстрее движется зона кислоты. В результате раздельных опытов с аммонийными солями карбоновых кислот путем восходящего линейного хроматографирования с проявлением смесью 1 мл конц. раствора аммиака и 100 мл 95%-ного спирта и последующим окрашиванием пятен раствором 50 мг бромфенолблау и 200 мг лимонной кислоты в 100 мл воды были получены следующие данные (табл. 97). [c.304] Аналогичные наблюдения были сделаны в отношении а-амино-кислот. При восходяш,ем линейном хроматографировании с помощью смеси фенола с водой (80 20) и окрашивании пятен раствором 400 мг нингидрина и 1,5 мл коллидина или пиридина в 100 мл 95%-ного этанола были получены величины Яр приведенные в табл. 98. [c.305] Аспарагиновая кислота Глутаминовая кислота. [c.305] Вернуться к основной статье