ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Получение меченых соединений методом биосинтеза из "Радиоактивные изотопы в химических исследованиях" При получении некоторых меченых органических веществ, имеющих большое значение для химических, биохимических и биологических исследований, значительную роль играет метод биосинтеза. В этом случае используется способность низших организмов осуществлять весьма разнообразные и сложные синтезы [96, 97]. Метод биосинтеза иногда, оказывается более доступным, чем химический синтез, а получение радиоактивных белков, нуклеино- вых кислот и некоторых других биополимеров вообще возможно только с помощью этого метода. [c.56] В то время как при обычных методах синтеза радиоактивный углерод внедряется в одно или два положения, при биосинтезе образуются соединения, меченные углеродом во всех положениях. Это дает возможность получать вещества с очень большой удель- ой активностью (до 200—250 л/сюры/г). [c.56] Другой важной особенностью биосинтеза является то, что в случае соединений с асимметричными атомами углерода он приводит к образованию исключительно /-форм, тогда как в условиях химического синтеза образуются рацемические смеси /- и -форм.-Поскольку в биологических процессах участвуют только соединения /-форм, половина активности соединений, полученных методом химического синтеза, фактически оказывается балластом. [c.56] Наибольший интерес для получения биологически важных соединений, меченных представляет метод биосинтеза из простейших соединений углерода, азота и воды. При этом источни-жом радиоактивного углерода может служить ВаС Юз. [c.56] В качестве примера метода биосинтеза рассмотрим получение меченых аминокислот с помощью одноклеточных водорослей вида хлорелла, культивируемых на среде, содержащей углерод-14. Радиоактивный углерод фиксируется преимущественно в белковом компоненте хлореллы в результате последующего кислотного гидролиза хлореллы значительная доля углерода-14 оказывается в образующихся аминокислотах [98]. [c.57] Выделение меченых аминокислот достигается следующим образом. Водоросли настаивают в 80% этиловом спирте, затем отделяют центрифугированием и подвергают гидролизу 6н. H I в запаянной ампуле при 105—110° С. Белковый гидролизат упаривают в вакууме и очищают от углеводов, органических кислот и гуминоподобных веществ. Раствор, содержащий смесь аминокислот пропускают через катионит КУ-2 в Н+-форме. Использование в качестве элюента соляной кислоты различной концентрации позволяет разделить смесь на отдельные группы аминокислот (рис. 14). Разделение групп аминокислот на индивидуальные соединения можно осуществить методом препаративной бумажной хроматографии. [c.57] Биосинтез с участием углерода-14 позволяет получать, помимо аминокислот, многие другие ценные продукты. Так, при поглощении С Юг листьями табака, фасоли или репы получается крахмал-С , гидролиз которого приводит к образованию меченой глюкозы. [c.57] Вернуться к основной статье