ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Количественная тонкослойная хроматография иа основе j сканирующей флюориметрии из "Хроматография полимеров" Двухкоординатная денситометрия точечным световым зондом. [c.270] При сканирующей денситометрии точечным световым зондом необходимо выбрать оптимальный его размер. Показано [141, что размер зонда должен составлять 0,1 размера хроматографического пятна. [c.271] Денситометрия точечным зон дом при многократных парад лельных прохождениях хромат о графического пятна в одном направлении. Конечные размеры светового зонда приводят к его неравномерному заполнению. [c.272] Метод многократного сканирования желательно использовать при денситометрии хроматографических пятен неправильной, отличной от (Vn.21) формы, а при раздельной записи каждого сканирования по оси у — для отыскания распределения вещества вдоль этой оси и сравнения его количества в разных пятнах. [c.273] Наиболее простой и точный способ основан на измерении нативной флюоресценции. Здесь возникают два требования к технике эксперимента тщательное удаление возбуждающего излучения, рассеиваемого слоем сорбента и обеспечение точного соответствия меяаду количеством флюоресцирующего вещества в хроматографическом пятне и интенсивностью света, собираемого фотоприемником прибора. Нарушение последнего условия может происходить за счет ослабления возбуждающего излучения по мере проникновения света в глубь слоя сорбента, рассеяния и гашения света флюоресценции, испускаемого веществом, находящимся в глубине слоя сорбента, собственной флюоресценции сорбента. Эти обстоятельства затрудняют использование флюоресцентного метода как абсолютного метода количественного анализа. Однако при одновременном хроматографировании на одной пластинке анализируемого вещества и эталонного могут быть получены точные результаты. [c.274] В том случае, когда анализируемое вещество приобретает флюоресцентные свойства в результате специальной обработки, существенное значение для точности анализа также имеют перечисленные выше условия. Однако если обработка флюорогенным реагентом производится после хроматографирования, то необходимо обеспечить однородное прокрашивание хроматографического слоя, как в глубину, так и по плоскости пластинкн. [c.274] Вернуться к основной статье