ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Равновесная модель для сорбции с постоянной константой связывания из "Аффинная хроматография" Список обозначений см. на стр. 35. [c.20] В Присутствии конкурентного ингибитора равновесие сдвигается в сторону возрастания концентрации фермента в растворе. [c.22] Ошибка, возникающая в результате принятого приближения, составляет 2,6% для Л = 0,1, -5,2% для Л =0,2 и 17,1% для Л = 0,5. Величина В, определяемая уравнением (3.4), обычно близка единице если допустить, что 3=1, то из уравнения (3.5) получаем, что Л равно учетверенному отношению числа молей фермента к числу молей лиганда. В обычных условиях концентрация фермента в растворе составляет моль/л, а типичная концентрация лиганда в фазе геля обычно 10 моль/л. Следовательно, при разумном соотношении объемов раствора V и геля ошибка, вносимая аипроксимацией, весьма мала. [c.23] В большинстве случаев в знаменателе уравнения (3.8) много меньше суммы двух других слагаемых и им можно пренебречь. [c.23] Это отношение показывает распределение фермента между двумя фазами, а различие между уравнениями (3.9) и (3.8) обусловлено ферментом, включенным в гель дополнительно к комплексу с лигандом. [c.23] АМР на сефарозе [4]. Связаны ли наблюдаемые различия в ходе этих кривых с различиями констант равновесия для образования индивидуальных комплексов, к сожалению, не известно автору этой книги однако, судя по концентрациям растворов хлорида калия, необходимых для элюирования каждого фермента с упомянутого нуклеотидного носителя, связывание глицерокиназы слабее лактатдегидрогеназ (табл. 4.2). [c.25] Образец (100 мкл) фермента (5 Е) и бычьего сывороточного альбумина (1,5 мг) наносили на колонку (50x5 мм), содержащую 1.0 г аффинного сорбента, разбавленного до необходимой концентрации лиганда сефарозой 4В. / — лактатдегидрогеназа из скелетных мышц кролика 2 — лактатдегидрогеназа из мышц сердца свиньи 3 — глицерокииаза. [c.25] Доля общего количества лигандных групп, которые в данных условиях насыщаются молекулами фермента, выражается отношением ЕЬ1Ьо, которое может быть получено, если обе части уравнения (3.7) разделить на о. Если на рис. 3.3 о по оси абсцисс заменить на ЕоУ, а вместо Кь в качестве переменного параметра использовать выражение KL V+v) +Ьои, то отношение ЕЬ1Ьо определяет ординату. [c.25] Вернуться к основной статье