ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение метода хроматографии из "Физико-химические основы хроматографического разделения" Хроматография — физико-химический метод разделения, основанный на распределении разделяемых компонентов между двумя фазами одна фаза неподвижная, другая — подвижная, непрерывно протекающая через неподвижную фазу. В отличие от других методов разделения, также основанных на распределении веществ между фазами, хроматография — метод динамический, так как разделение происходит в потоке подвижной фазы. Целью разделения может быть препаративное выделение веществ в чистом виде и физико-химические измерения. Так как хроматографию чаще всего используют для анализа, то можно дать еще следующее определение хроматографии как аналитического метода. Хроматография — это физико-химический метод анализа сложных смесей (газов или жидкостей) путем предварительного разделения их при движении по слою сорбента за счет различий межмолекулярных взаимодействий (в общем случае за счет различной сорбируемо-сти) и последующего определения разделённых компонентов на выходе из колонки с помощью специальных датчиков — детек- торов. [c.11] Хроматография была открыта М. С. Цветом в 1901 —1903 гг. [1, 2] в процессе изучения состава хлорофилла и механизма фотосинтеза. Им была разработана аппаратура и предложены основные варианты метода [3—5]. [c.11] Опыты Цвета были воспроизведены лишь в 1931 г. Куном, Вин-терштейном и Ледерером, после чего хроматография вызвала интерес многих ученых и начала развиваться быстрыми темпами. Ниже приведены хронологические таблицы основных открытий в хроматографии [6]. [c.11] На практике используют различные методы и варианты хроматографии в зависимости от способа перемещения анализируемой смеси, агрегатного состояния подвижной и неподвижной фаз, формы сорбционного слоя и т. д. [c.11] Этот метод получил наибольшее расдространение в аналитической практике благодаря следующим преимуществам. [c.13] По сравнению с проявительным методом фронтальная хроматография имеет существенные недостатки. [c.14] Количественный анализ проводят по высоте ступени. [c.14] Этот метод мало используют для целей анализа, значительно чаще его применяют для концентрирования легких или тяжелых компонентов. [c.14] По сравнению с проявительным методом в вытеснительной хроматографии также имеются недостатки. [c.14] Этот метод, как и фронтальный, мало используют в аналитической практике, его иногда применяют для препаративных разделений. [c.14] Адсорбционная хроматография основана на различной адсор-бируемости веществ адсорбентом. В этом случае хроматографическая колонка заполнена зернами твердого тела (адсорбента) с высокоразвитой поверхностью [13]. [c.14] Распределительная хроматография основана на различной растворимости разделяемых компонентов в пленке жидкой фазы. Пленку малолетучей высококипящей жидкости наносят на поверхность твердого макропористого носителя [14]. [c.15] Адсорбционная и распределительная хроматографии получили наибольшее распространение в аналитической практике. [c.15] Ионообменная хроматография. Разделение основано на различии констант ионообменного равновесия между двумя фазами. Колонку заполняют нонообмеиниками (анионо- или катионооб-менниками)—твердыми веществами, имеющими ионообменные группы. Этот метод хроматографии используют для разделения ионов [15]. [c.15] Этот метод интенсивно развивается. Его широко применяют для разделения веществ с большими молекулярными весами—в биохимии и химии полимеров. Особенно велика его роль в химии полимеров для определения их молекулярно-весовых распределений. [c.15] Для селективного выделения и очистки биологически активных веществ, в частности ферментов, применяют биоснецифическую (афинную) хроматографию [17], основанную на специфических силах сродства, лежащих в основе биологической функции фермента, В качестве сорбента используют специальные нерастворимые лиганды, которые избирательно связывают только определенные ферменты. Связь между молекулой фермента и лигандом осуществляется за счет нековалентных связей. Многосторонний контакт между молекулами фермента и лиганда, приводящий к высокой избирательности сорбции, обеспечивается определенным пространственным расположением функциональных групп фермента, связанным с его уникальной геометрической структурой, при этом имеет место соединение типа ключ — замок . [c.15] В зависимости от агрегатного состояния подвижной фазы различают газовую и жидкостную хроматографию. [c.15] В жидкостной хроматографии в качестве подвижной фазы используют жидкость. Так же как и в газовой хроматографии, в зависимости от агрегатного состояния неподвижной фазы могут быть варианты жидкостно-адсорбционной и жидкостно-жидкостной хроматографии. [c.16] В зависимости от формы и вида слоя сорбента различают методы колоночной и плоскостной хроматографии. [c.16] В колоночной хроматографии сорбент помешают в специальные трубки—колонки, в которых слой сорбента принимает форму цилиндра. В колоночной хроматографии используют набивные (на-садочные) и капиллярные колонки. В набивных колонках весь объем трубок заполняется зернами сорбента. В капиллярных же колонках сорбент наносят только на внутреннюю поверхность в виде тонкого слоя (а центральная часть остается пустой), поэтому их иногда называют незаполненными колонками. [c.16] Вернуться к основной статье