ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение белков сыворотки крови биуретовым методом из "Руководство к практическим занятиям по биологической химии Издание 2" Биуретовый метод относится к колориметрическим методам анализа и основан на цветной биуретовой реакции (см. стр. 9). [c.227] Окраску, получаемую при реакции с раствором исследуемой сыворотки, сравнивают в колориметре с окраской стандартного раствора сыворотки, содержание белка в которой предварительно определено по методу Кьельдаля. [c.227] Для определения соотношения отдельных фракций в сыворотке крови, определяют общее количество и количество альбуминов, после осаждения глобулинов. Содержание глобулинов определяют по разности между общим количеством белка и количеством альбумина. [c.227] Ход работы. Определение общего количества белка. [c.227] В каждую пробирку наливают по 3 мл биуретового реактива перемешивают и оставляют на 30 минут. По истечении этого срока колориметрируют и вычисляют содержание белка в сыворотке крови (Колориметрирование и вычисление см. стр. 238, 239). [c.228] В 2 центрифужные пробирки наливают. по 4,8 мл 29% раствора сернокислого натрия для осаждения глобулинов и добавляют В одну — 0,2 мл исследуемой сыворотки, во вторую 0,2 мл стандартной сыворотки. Пробирки закрывают пробками и содержимое перемешивают в течение 30 секунд. Пробирки уравновешивают на центрифужных весах с двумя другими пробирками с водой и ставят в центрифугу в противоположные гнезда (равновесные пробирки). Центрифугируют 10 минут при 2000 оборотах в минуту. [c.228] Прозрачные растворы альбумина отсасывают пипетками и переносят по 3 мл в чистые пронумерованные пробирки. В каждую пробирку добавляют по 3 мл биуретового реактива, перемешивают и оставляют на 30 минут. По истечении этого срока, окраску исследуемого раствора сравнивают в колориметре с окраской раствора стандартной сыворотки, в которой известно содержание альбумина. [c.228] Запись результатов колориметрирования и вычисление произ-водят в тетради так, как указано на стр. 238, 239. [c.228] Определяют отношение количества альбуминов и глобулинов в исследуемой сыворотке-задаче. [c.228] Вернуться к основной статье