ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Приготовление буферных смесей и изучение их свойств из "Практикум по биологической химии" Ход работы. I. Для изучения свойств буферных смесей приготовить смесь 25. Такая смесь имеет pH 7,0, т. е. примерно ту же концентрацию водородных ионов, что и дистиллированная вода. Добавить к смеси и к дистиллированной воде две-три капли метилоранжа и затем по каплям 0,1 н. раствор соляной кислоты до появления розовой окраски. Сравнить количество пошедшей в том и в другом случае кислоты. [c.30] Повторить опыт, прибавляя к той же смеси и воде фенолфталеин и затем 0,1 н. раствор едкого натра до появления розовой окраски. [c.30] Чтобы резко изменить концентрацию водородных ионов Ьоды, требуется добавление ничтожного количества кислоты или щелочи, в то время как для достижения такого же изменения в буферной смеси необходимо добавление значительного количества кислоты или щелочи. [c.31] Из опыта можно сделать вывод о сравнительно малом изменении концентрации водородных ионов буферной смеси при разведении ее водой. [c.31] Ход работы. Исследуя водопроводную воду с серией индикаторов (см. работу 14), найти индикатор, дающий окраску переходную между кислой и щелочной. Затем приготовить несколько буферных смесей, pH которщ лежит в интервале переходной окраски выбранного индикатора. [c.31] Прибавить к этим смесям и к водопроводной воде равные количества того же индикатора и найти путем колориметрическогс сравнения буферную смесь, отвечающую по окраске исследуемой воде. [c.32] Этим же способом с буферными смесями определить pH мочи. При этом пользоваться компаратором и теми указаниями, которые сделаны при описании работы 15. Сравнить результат определения с результатом, полученным безбуферным методом. [c.32] Ход работы. Составить гальваническую цепь из двух электродов стандартного, с известной величиной электродного потенциала, и исследуемого, содержащего раствор водородных ионов неизвестной концентрации (рис. 7). [c.32] Вывод формулы следует ниже. [c.33] Каломель — труднорастворимое соединение, следовательно, концентрация ионов ртути в растворе очень мала, а в присутствии хлористого калия еще больше понижается, так как у обоих солей имеется общий ион С1 , и остается постоянной при сохранении концентрации КС1 неизменной. Потенциал такого электрода зависит от концентрации ионов хлора и следовательно от концентрации КС1. [c.33] Измерение потенциала этой окислительно-восстановительной системы позволяет определить pH среды, так как равновесие зависит от концентрации ионов водорода. [c.34] Стандартный (нормальный) потенциал хингидронного электрода при 18° С 8хг =0,7044 в. [c.34] Где есть белки, а они образуют основу того вещества, которое мы называем протоплазмой, мы имеем не только материал — самое сложное органическое вещество, но и орудие — фермент, обусловливающее возможность бесконечного ряда продуктов его распадения и их обратного синтеза. В комке белкового вещества потенциально дан весь разнообразный химизм живого тела. [c.35] Ферментами, или энзимами, называются биокатализаторы разнообразных реакций обмена веществ, которые лежат в основе жизнедеятельности организма. Поэтому изучение как самих ферментов, так и ферментативных реакций является одной из важнейщих задач биохимии. Ферментативное действие впервые было открыто русским ученым Кирхгофом в 1811 г. [c.35] Ферменты, как и всякие катализаторы, изменяют лишь скорость, с которой достигается состояние равновесия обратимой реакции, но не влияют на положение этого равновесия, и поэтому в зависимости от соотношения реагирующих веществ один и тот же фермент может ускорять как прямую, так и обратную реакцию. [c.36] По своей химической природе ферменты — белковые вещества, обладающие высоким молекулярным весом (от 127000 — рибонуклеаза, до 1000 000 — пируватдекарбоксилаза зародыша пшеницы) и коллоидными свойствами. Ферменты находятся в очень малых количествах во всех живых клетках и жидкостях организма при этом в различных клетках могут содержаться самые разнообразные ферменты. Одни ферменты сравнительно хорошо растворимы в воде и поэтому легко извлекаются из клеток, другие — прочно связаны с элементами клеточной структуры и могут быть извлечены в раствор только после механического разрушения или автолитического расщепления клеток. [c.36] Выделить ферменты в очищенном состоянии трудно. Однако многие ферменты получены в виде белковых микрокристаллов. [c.36] Ферменты — мультимеры (большинство ферментов построено из отдельных субъединиц — высокомолекулярных белков диссоциирующих на протомеры) обладают наибольшей активностью в целом, непродиссоциированном состоянии. При диссоциации на протомеры резко снижается их каталитическая активность. [c.36] Для многих ферментов (ферментов-протеидов) установлено наличие двух компонентов белкового вещества (апоферыента) и простетической, или активной, группы (кофермента)—вещества небелкового характера или, в некоторых случаях, атома тяжелого металла (некоторые оксидазы, например, являются Си-протеидами). При этом-у одних ферментов эти компоненты прочно между собой связаны, у других же — связь эта непрочна и фермент в растворе находится в значительной части в диссоциированном состоянии в виде кофермента и апофермента, причем кофермент, в противоположность апоферменту, диффундирует через полупроницаемые мембраны и является термостабильным. [c.36] Вернуться к основной статье