ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Данные о существовании фермент-субстратного комплекса из "Биохимия растений" Флавинмононуклеотид и флавинадениндинуклеотид можно отделить от определенных апоферментов с помощью обработки сульфатом аммония в кислой среде. Если флавины добавить к растворам соответствующих апоферментов, то они вновь соединятся, причем максимум спектра поглощения свободных флавипов (445—450 ммк) смещается в сторону длинных волн в случае старого желтого фермента (флавинмононуклеотида) до 465 ммк. Исходя из этого факта, Теорелл и Бонниксен [30] стали искать аналогичный сдвиг в спектре поглощения НАД-Нз при соединении этого вещества с алкогольдегидрогеназой печени. [c.62] Лактатдегидрогеназа из сердечной мышцы образует комплекс с НАД-Нг, который можно обнаружить по максимуму спектра поглощения при 330 ммк. [c.63] Исследования других спектроскопически различных фермент-субстратных комплексов не были особенно успешными однако-получены данные об изменении флуоресценции при добавлении НАД-Нг к ряду ферментов, в том числе к алкогольдегидрогеназе дрожжей и глутаматдегидрогеназе печени. [c.63] Если в качестве субстрата используют глюкозо-1-фосфат, меченный то Р включается в фермент после кислотного гидролиза было показано, что фосфат присоединяется к остатку серина (см. стр. 70). По существу такие же реакции происходят с ферментом фосфоглицеромутазой. [c.65] Ферменты и фермент-субстратные комплексы можно осаждать в условиях, в которых создается лишь небольшой градиент концентраций свободного субстрата. [c.65] Если к раствору НАД прибавить дрожжевую алкогольдегидро-геназу, то можно осадить в ультрацентрифуге свободный фермент и комплекс фермента с НАД, а затем измерить в надосадочной жидкости концентрацию свободного НАД. На основании полученных данных вычисляют константу диссоциации (табл. 8). [c.65] Вернуться к основной статье