ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Определение азота аминных групп методом формольного титрования из "Практикум по биологической химии" Методом формольного титрования Сёренсена оттит-ровывают свободные карбоксильные группы аминокислот, связывая а минные группы формальдегидом. [c.38] Аминокислоты содержат одновременно основную амин-ную и кислую карбоксильную группы. Они обладают амфотерными свойствами и в водных растворах обнаруживают нейтральную реакцию . На основании этого считают, что в аминокислотах аминная и карбоксильная группы нейтрализуют друг друга. [c.38] Таким образом, аминокислоты в водных растворах обладают характером внутримолекулярных со-л е й следовательно, непосредственно титровать карбоксильные группы аминокислот щелочью невозможно. [c.38] Количество титруемых при этом карбоксильных групп эквивалентно количеству связанных формальдегидом аминных групп. Таким образом, результат титрования указывает на содержание аминных групп. [c.39] На этом свойстве аминокислот вступать во взаимодействие с формальдегидом и последующем титровании их щелочью и основано количественное определение свободных аминных групп по Сёренсену. [c.39] Точка эквивалентности при титровании метиленаминокислот по этому методу имеет место при рН=9,0—9,5. Поэтому в качестве индикатора при титровании лучше всего пользоваться тимолфталеином, который изменяет свою окраску именно в этих пределах pH. Если же в качестве индикатора пользоваться фенолфталеином, как это обычно делают, то титровать нужно до яркокрасного окрашивания (pH = 9,1). Так как бывает трудно сразу точно оттитровать щелочью, не прилив избытка, то избыток щелочи оттитровывают кислотой (обратное титрование) и снова добавляют щелочи до нужного оттенка. При расчете учитывают все количество прилитой щелочи за вычетом кислоты. [c.39] Метод формольного титрования довольно прост однако следует помнить, что получаемые этим методом цифры не дают вполне точных данных о содержании азота аминогрупп. Пролин дает с формальдегидом нестойкое соединение и несколько снижает результаты определения тирозин, наоборот, вследствие присутствия фенольной группы дает повышенные результаты. [c.39] Для ознакомления с этим методом можно воспользоваться раствором глицина. [c.39] При достаточном количестве времени полезно определить аминоазот на разных стадиях кислотного или ферментативного гидролиза белка. [c.39] Приборы. 1. Конические колбочки, 2 шт. [c.39] На опытную пробу пошло 9,05 мл 0,2 н. едкого натра. [c.41] На контроль пошло 0,26 мл 0,2 н. едкого натра. [c.41] Истрачено 9,05 мл — 0,26 мл = 8,79 мл 0,2 н. едкого натра. [c.41] Таким образом, в 20 мл исследуемого раствора содержится 8,79 х2,8 = 24,61 мг аминного азота. [c.41] Лепешинской, неклеточное живое вещество, способное образовывать клетки, содержит нуклеопротеиды. [c.42] Биологическая роль нуклеопротеидов тесно связана с процессами роста и морфогенеза. Особенно важной функцией нуклеопротеидов является, повидимому, синтез белка. Быстро растущие органы и ткани (эмбриональные ткани, опухоли), а также органы, в которых интенсивно происходят синтетические процессы (кроветворные органы, поджелудочная железа,. половые и другие железы), содержат особенно много нуклеопротеидов. Очень богаты нуклео-протеидами бактерии и другие микроорганизмы, а вирусы почти полностью построены из этих соединений. [c.42] Нуклеопротеиды состоят из простых белков и сложных высокомолекулярных соединений — нуклеиновых кислот. Различают два типа нуклеиновых кислот рибонуклеиновую и дезоксирибонуклеиновую. [c.42] Прежде считали, что нуклеопротеиды (от латинского nu leus — ядро) содержатся только в клеточных ядрах, причем рибонуклеиновая (дрожжевая нуклеиновая) кислота характерна для растений, а дезоксирибонуклеиновая (тимонуклеиновая) кислота — для животных. Теперь показано, что дезоксирибонуклеиновая кислота является составной частью клеточных ядер как животных, так и растений, в то время как рибонуклеиновая кислота содержится в основном в цитоплазме клеток (особенно богаты ею митохондрии и микросомы). [c.42] Нуклеопротеиды растворимы в щелочной среде и осаждаются кислотами ядерные нуклеопротеиды осаждаются при малых концентрациях солей, но растворимы в крепких солевых растворах. [c.44] Если нуклеопротеиды кипятить с разведенными кислотами, то они подвергаются гидролитическому распаду — отщепляется и частично гидролизуется белок нуклеиновые кислоты деполимеризуются, отщепляют пуриновые основания, моносахарид и фосфорную кислоту. Пиримидиновые основания отщепляются только при глубоком гидролизе нуклеиновых кислот. [c.44] Вернуться к основной статье