Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English
Измерение интенсивности флуоресценции обычно достигается облучением раствора пробы монохроматическим светом и наблюдением испускаемого излучения под прямым углом по отношению к падающему лучу. Как было показано выше, вещества поглощают свет избирательно, и флуоресценция имеет сдвиг в более длинноволновую область. Фактически кривые ноглощепия 1 и флуоресценции 2 имеют общую форму, показанную на рис. 81, и наибольшая эффективность достигается в том случае, если падающий свет имеет длину волны, соответствующую максимуму поглощения А. Флуоресценция возбуждается, хотя излучение при некоторых длинах волн перекрывается поглощением.

ПОИСК





Измерение флуоресценции

из "Аналитическая геохимия"

Измерение интенсивности флуоресценции обычно достигается облучением раствора пробы монохроматическим светом и наблюдением испускаемого излучения под прямым углом по отношению к падающему лучу. Как было показано выше, вещества поглощают свет избирательно, и флуоресценция имеет сдвиг в более длинноволновую область. Фактически кривые ноглощепия 1 и флуоресценции 2 имеют общую форму, показанную на рис. 81, и наибольшая эффективность достигается в том случае, если падающий свет имеет длину волны, соответствующую максимуму поглощения А. Флуоресценция возбуждается, хотя излучение при некоторых длинах волн перекрывается поглощением. [c.253]
Вследствие этой особенности большинство веществ, флуоресцирующих в видимой области, могут быть возбуждены линией 3650 А от ртутной лампы высокого давления. Это представляет большое удобство, так как источнику присуща высокая яркость. [c.253]
Так как интенсивность флуоресценции слаба, необходимо исключить попадание падающего света на детектор. Это достигается соответствующим размещением светофильтров. Один оптический фильтр, помещенный между лампой и пробой, выделяет линию ртути 3650 А, а другой (между пробой и детектором) позволяет проходить флуоресценции, но не падающему свету. [c.253]
До настоящего времени все выпускаемые промышленностью приборы были нуль-регистрпрующего типа и не обладали достаточной чувствительностью для измерения интенсивности флуоресценции очень разбавленных растворов. В результате исследователи создавали свои собственные приборы. Прибор, описанный здесь, явился наилучшей моделью из ряда прототипов и был разработан в связи с необходимостью выполнения около 250 измерений в день в течение длительного периода, причем в некоторых растворах флуоресценция была очень слабой. Прибор, отличающийся внешним видом, но аналогичный по принципу работы, был применен У. Д. Эвансом и др. [3]. [c.253]
Очевидно, что идеальный прибор должен иметь прямой отсчет показаний и конструкцию, позволяющую после начальной установки И калибровки пропускать пробы одну за другой и записывать показания измерительного прибора. На первый взгляд это представляется простой задачей, логическим решением которой является применение стабилизированной осветительной лампы наряду с высокоста-билизированным и чувствительным измерительным устройством. [c.254]
Но полностью стабилизировать ртутную дугу, используемую для освещения пробы, оказалось невозможным. Даже если приложенное напряжение поддерживается постоянным, изменение температуры лампы и отклонение дуги вокруг электродов приводят к изменению интенсивности света. Поэтому был испробован другой подход. Разработанный в конечном итоге прибор показан схематически на рис. 82. [c.254]
Свет от источника 1, 125-ваттной ртутной дуги высокого давления, посредством линзы 2 становится параллельным и проходит через первичный светофильтр 3. Проба 5 освещается этим светом. Флуоресцентное излучение, наблюдаемое под прямым углом к падающему свету, проходит через вторичный светофильтр 6 и попадает на фотоумножитель 7. Далее сигнал попадает на усилитель 9 и снимается непосредственно с измерительного прибора 8. [c.254]
Сигнал с фотоумножителя резко возрастает с увеличением приложенного анодного напряжения, поэтому в большинстве приборов это напряжение высоко стабилизировано, что может быть достигнуто следующим образом. [c.254]
Небольшая часть света, пропущенного первичным фильтром 3, отражается зеркалом 4 через переменное отверстие 12 фотоумножитель 11. Сигнал с фотоумножителя попадает на регулирующий блок 10, который подает напряжение параллельно на оба фотоумножителя. Это напряжение может колебаться таким образом, что сигнал с фотоумножителя 11 будет поддерживаться постоянным, т. е. при увеличении интенсивности лампы приложенное напряжение уменьшится и наоборот. [c.255]
Так как фотоумножители 7 и 11 питаются от одного и того же источника напряжения и имеют одинаковые характеристики, сигнал с фотоумножителя 7 не будет зависеть от флуктуаций интенсивности лампы и является функцией только концентрации пробы 5. [c.255]
Проточная кювета изготавливается из тонкостенной стеклянной трубки диаметром около 1,27 см и длиной 3,8 см. Центральная часть (2,5 см) освещается. Для уменьшения рассеяния излучения концы и соединительная трубка окрашены в черный цвет. Наполняется и освобождается кювета с помощью вакуумного водяного насоса, так что отработанная проба немедленно удаляется. Схема устройства показана на рис. 84. При установке втулки 3 в положение заполнение проба из воронки 2 соединяется с дном кюветы 1, а вакуумная линия — с ее верхом. В положении слив соединение будет обратным, так что кювета полностью освобождается. Проточная кювета и соединительная система для эффективного промывания и наполнения требуют только 20 —25 мл раствора, но если количество пробы ограничено, то можно поставить другой блок, в котором для замены требуется только около 4 мл раствора. [c.256]
Кратковременная и долговременная стабильность прибора очень хорошая. Изменение основного напряжения от 190 до 270 в не оказывает влияния на показания, и после калибровки прибор может использоваться в течение длительного времени только с периодическими проверками. Чувствительность ограничена лишь эффективностью сочетания светофильтров и флуоресценцией оптики. [c.256]


Вернуться к основной статье


© 2025 chem21.info Реклама на сайте