ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Измерение флуоресценции из "Аналитическая геохимия" Измерение интенсивности флуоресценции обычно достигается облучением раствора пробы монохроматическим светом и наблюдением испускаемого излучения под прямым углом по отношению к падающему лучу. Как было показано выше, вещества поглощают свет избирательно, и флуоресценция имеет сдвиг в более длинноволновую область. Фактически кривые ноглощепия 1 и флуоресценции 2 имеют общую форму, показанную на рис. 81, и наибольшая эффективность достигается в том случае, если падающий свет имеет длину волны, соответствующую максимуму поглощения А. Флуоресценция возбуждается, хотя излучение при некоторых длинах волн перекрывается поглощением. [c.253] Вследствие этой особенности большинство веществ, флуоресцирующих в видимой области, могут быть возбуждены линией 3650 А от ртутной лампы высокого давления. Это представляет большое удобство, так как источнику присуща высокая яркость. [c.253] Так как интенсивность флуоресценции слаба, необходимо исключить попадание падающего света на детектор. Это достигается соответствующим размещением светофильтров. Один оптический фильтр, помещенный между лампой и пробой, выделяет линию ртути 3650 А, а другой (между пробой и детектором) позволяет проходить флуоресценции, но не падающему свету. [c.253] До настоящего времени все выпускаемые промышленностью приборы были нуль-регистрпрующего типа и не обладали достаточной чувствительностью для измерения интенсивности флуоресценции очень разбавленных растворов. В результате исследователи создавали свои собственные приборы. Прибор, описанный здесь, явился наилучшей моделью из ряда прототипов и был разработан в связи с необходимостью выполнения около 250 измерений в день в течение длительного периода, причем в некоторых растворах флуоресценция была очень слабой. Прибор, отличающийся внешним видом, но аналогичный по принципу работы, был применен У. Д. Эвансом и др. [3]. [c.253] Очевидно, что идеальный прибор должен иметь прямой отсчет показаний и конструкцию, позволяющую после начальной установки И калибровки пропускать пробы одну за другой и записывать показания измерительного прибора. На первый взгляд это представляется простой задачей, логическим решением которой является применение стабилизированной осветительной лампы наряду с высокоста-билизированным и чувствительным измерительным устройством. [c.254] Но полностью стабилизировать ртутную дугу, используемую для освещения пробы, оказалось невозможным. Даже если приложенное напряжение поддерживается постоянным, изменение температуры лампы и отклонение дуги вокруг электродов приводят к изменению интенсивности света. Поэтому был испробован другой подход. Разработанный в конечном итоге прибор показан схематически на рис. 82. [c.254] Свет от источника 1, 125-ваттной ртутной дуги высокого давления, посредством линзы 2 становится параллельным и проходит через первичный светофильтр 3. Проба 5 освещается этим светом. Флуоресцентное излучение, наблюдаемое под прямым углом к падающему свету, проходит через вторичный светофильтр 6 и попадает на фотоумножитель 7. Далее сигнал попадает на усилитель 9 и снимается непосредственно с измерительного прибора 8. [c.254] Сигнал с фотоумножителя резко возрастает с увеличением приложенного анодного напряжения, поэтому в большинстве приборов это напряжение высоко стабилизировано, что может быть достигнуто следующим образом. [c.254] Небольшая часть света, пропущенного первичным фильтром 3, отражается зеркалом 4 через переменное отверстие 12 фотоумножитель 11. Сигнал с фотоумножителя попадает на регулирующий блок 10, который подает напряжение параллельно на оба фотоумножителя. Это напряжение может колебаться таким образом, что сигнал с фотоумножителя 11 будет поддерживаться постоянным, т. е. при увеличении интенсивности лампы приложенное напряжение уменьшится и наоборот. [c.255] Так как фотоумножители 7 и 11 питаются от одного и того же источника напряжения и имеют одинаковые характеристики, сигнал с фотоумножителя 7 не будет зависеть от флуктуаций интенсивности лампы и является функцией только концентрации пробы 5. [c.255] Проточная кювета изготавливается из тонкостенной стеклянной трубки диаметром около 1,27 см и длиной 3,8 см. Центральная часть (2,5 см) освещается. Для уменьшения рассеяния излучения концы и соединительная трубка окрашены в черный цвет. Наполняется и освобождается кювета с помощью вакуумного водяного насоса, так что отработанная проба немедленно удаляется. Схема устройства показана на рис. 84. При установке втулки 3 в положение заполнение проба из воронки 2 соединяется с дном кюветы 1, а вакуумная линия — с ее верхом. В положении слив соединение будет обратным, так что кювета полностью освобождается. Проточная кювета и соединительная система для эффективного промывания и наполнения требуют только 20 —25 мл раствора, но если количество пробы ограничено, то можно поставить другой блок, в котором для замены требуется только около 4 мл раствора. [c.256] Кратковременная и долговременная стабильность прибора очень хорошая. Изменение основного напряжения от 190 до 270 в не оказывает влияния на показания, и после калибровки прибор может использоваться в течение длительного времени только с периодическими проверками. Чувствительность ограничена лишь эффективностью сочетания светофильтров и флуоресценцией оптики. [c.256] Вернуться к основной статье