ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Факторы, влияющие на процесс ренатурации из "Органическая химия нуклеиновых кислот" Имеются два рода факторов, влияющих на ренатурацию факторы, зависящие от свойств самой ДНК, т. е. структурные, и факторы, связанные с условиями ренатурации. [c.275] Для данной ДНК уменьшение ее молекулярного веса путем дробления сопровождается уменьшением константы скорости ренатурации 2, так что последняя все время остается пропорциональной корню квадратному из длины молекулы L (длина здесь определяется как средне число нуклеотидов в одноцепочечном полинуклеотиде) кп — УЬ. [c.275] Содержание пар гуанин.цитозин. [c.276] Теоретическое рассмотрение кинетики процесса ренатурации основывается на следующих положениях. [c.277] Первым этапом, который определяет скорость процесса, является образование ядра , представляющего собой одну или несколько пар оснований, соответствующих парам, присутствовавшим в нативной молекуле. Возникновение такого ядра (или ядер ) может происходить на одном или нескольких определенных участках денатурированной молекулы. После возникновения ядра протекает быстрый процесс образования двойной спирали. [c.277] Расхождение предсказаний теории и экспериментальных данных по зависимости скорости ренатурации от длины молекулы связано, возможно, с тем, что вследствие клубкообразного характера денатурированных молекул на все потенциальные ядра образуются с одинаковой скоростью, так как часть из них спрятана внутри клубка. [c.277] В интервале pH 5—9 скорость ренатурации не зависит от значения pH при более низких и более высоких значениях pH скорость ренатурации понижается вследствие ионизации оснований. [c.278] Наконец, константа скорости ренатурации обратно пропорциональна вязкости среды при постоянном значении разности между Гщ ДНК и температурой ренатурации. [c.278] В итоге для практических целей оптимальными являются следующие условия ренатурации температура на 25° С ниже Гщ данной ДНК ионная сила 0,4 pH раствора в интервале 5—9. [c.278] Причины наблюдаемой зависимости скорости ренатурации от температуры и вязкости в настоящее время являются предметом обсуждения 2 . [c.278] В итоге, исходя из исследований по денатурации и ренатурации ДНК, можно заключить, что в определенных условиях двухспиральная структура ДНК типа Уотсона—Крика более стабильна, чем ее разделенные одноцепочечные компоненты. [c.279] Вернуться к основной статье