ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Действие алкилгалогенидов и эфиров серной и сульфоновых кислот из "Органическая химия нуклеиновых кислот" В качестве побочной реакции наблюдалось лишь метилирование по сахару (см. гл. 9) с образованием 3-М,2 -0-диметилуридина 2 . [c.360] Направление реакции при метилировании гуанозина также зависит от условий. При обработке диазометаном суспензии гуанозина в эфире наблюдается образование l-N-метилгуанозина LXIX 2 при реакции же в водно-эфирной среде был получен 7-Ы-метилгуанозин LXX204,214,215. [c.361] Соединение LXX было получено впервые взаимодействием диазометана с 2, 3, 5 -три-0-ацетилгуанозином в спиртовой среде первоначально, однако, ему была неправильно приписана структура 1-метилгуанозина, Метилирование дезоксигуанозина в водной среде протекает аналогичным образом 214 при реакции в смеси эфира и метанола обнаружены продукты замещения по N-1, N-7 и 6-экзо-О. [c.361] Способность рибонуклеозидов вступать в реакцию с диазометаном в водно-эфирной среде убывает в ряду о гуанозин уридин цитидин аденозин. Аналогичный ряд наблюдается и для четырех дезоксинуклеозидов (тимидин вместо уридина), однако в этом случае дезоксигуанозин реагирует намного быстрее, чем тимидин 20 . [c.361] При переходе от нуклеозидов к нуклеотидам возникает новая побочная реакция — алкилирование по атому кислорода остатка фосфорно кислоты. Реакцию проводят обычно в водных растворах при рН 7. При этом протонирован лишь один из атомов кислорода, и основным продуктом реакции являются фосфодиэфиры фосфотриэфиры образуются лишь в незначительных количествах. [c.363] Метилирование в аналогичных условиях ДНК из молок лосося с последующим кислотным гидролизом приводит к получению 7-К-метилгуанина (81%) и З-Ы-метиладенина ЬХХУП (19%). 1-Ы-Метиладенина и З-М-метилцитозина обнаружено не было. Необычное направление метилирования остатка аденина связано, очевидно, с относительной пространственной недоступностью атома N-1 аденина при двухспиральной структуре полимера. [c.364] Алкилирование не является, однако, единственной реакцией, происходящей при действии рассматриваемых нитрозосоединений на нуклеиновые кислоты. Другой протекающий при этом процесс — дезаминирование оснований, содержащих аминогруппу (см. гл. 6). [c.365] Этилирование нуклеозидов под действием борфторида три-этилоксония возможно, протекает через промежуточное образование алкильных радикалов. Эта реакция в отличие от большинства реакций алкилирования может быть выполнена в водном растворе. При обработке борфторидом триэтилоксония (pH 9) смеси аденозина, гуанозина, цитидина и уридина алкилированию подвергается только уридин. [c.365] Еше большая избирательность реакции наблюдается в случае ДНК, особенно при использовании нативного двухцепочечного комплекса. При этом реакционная способность остатка дезоксиаденозина существенно изменяется и метилирование происходит главным образом по N-3 56 это связано, очевидно, со стерическими ограничениями, налагаемыми вторичной структурой. Удается добиться 80%-ной модификации остатков дезоксигуанозина без затрагивания других нуклеозидов 247. [c.369] Модификация полинуклеотидов диметилсульфатом может быть применена для исследования первичной структуры. Специфическое метилирование по остатку дезоксигуанозина в ДНК и последующее выдерживание в нейтральной среде приводит к отщеплению 7-метилгуанина образующаяся дегуаниловая ДНК может быть расщеплена на блоки с помощью р-элиминации (см. гл. 1 и 10). В случае РНК метилирование можно использовать для повышения специфичности ферментативного расщепления, так как З -фосфо-диэфирная связь, образуемая остатком 3-Ы-мети,пцитидина, не расщепляется под действием панкреатической пиримидил-РНК-азы, а З -фосфодиэфирная связь, образуемая остатком 7-Ы-метил-гуанозина, — под действием гуанил-РНК-азы Т . Последний принцип был использован при установлении структуры 55 РНК (см. гл. 1). [c.369] Вторичная структура ДНК сильно влияет на протекание реакции метилирования под действием алкилирующих агентов (см. [c.369] Ряд исследований был посвящен изучению влияния метилирования на биологические свойства полинуклеотидов наблюдалось изменение способности синтетических полирибонуклеотидов направлять синтез полипептидов 25 инактивация тРНК мутагенный эффект при действии на ДНК или РНК вирусов. В случае ДНК биологическое действие связано, по-видимому, с отщеплением 7-Ы-метилгуанина (см. гл. 8). [c.370] Вернуться к основной статье