ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Гель- и эксклюзионная хроматография из "Химический анализ" Гель-хроматография характеризуется двумя необычными свойствами 1) подвижная и неподвижная фазы имеют одинаковый состав 2) в основе разделения лежит скорее размер частиц, чем их химические свойства. Растворенные вещества распределяются между подвижной и неподвижной фазами одинакового состава, из которых одна находится вне пористой набивки, а другая — внутри ее. Молекулы растворенного вещества, размеры которых слишком велики, чтобы они могли проникнуть в поры набивки, элюируются без задержки с удерживаемым объемом, равным мертвому объему и объему подвижной фазы. Молекулы меньшего размера проникают через неподвижный растворитель в поры набивки и элюируются с большим объемом удерживания. Замечательное качество метода состоит в том, что самые большие молекулы имеют наименьшие коэффициенты разделения, а самые малые — максимальные. В результате получают две основные фракции с молекулами меньше и больше, чем размер пор. Более селективные разделения возможны в тех случаях, когда размеры молекул близки к размерам пор. [c.548] В интервале молекулярных масс наиболее часто разделяемых соединений эмпирически установлена линейная зависимость между удерживаемым объемом и логарифмом молекулярной массы. Практически важная задача заключается в установлении интервала молекулярных масс соединений, которые можно разделять с помощью данной пористой набивки. Некоторые протеины используют как стандарты молекулярной массы [70], например цитохром С (молекулярная масса 13 000), миоглобин (17 800), трипсин (24 000), пепсин (35 500), яичный альбумин (45 000), мономер альбумина сыворотки (67 000), димер альбумина сыворотки (134 000), каталаза (230000). Получены фракции полистирола в качестве стандартов со средними молекулярными массами в интервале от 900 до 2 145 000. [c.549] Для разделения и характеристики полимеров обычно используют гранулы из сшитого полистирола (см. разд. 25-1), на которые наносят органические растворители. Такого типа жесткий гель — стирагель [77] может иметь поры с такими пределами эксклюзии, которые позволяют разделять молекулы размером от 4 до 10 нм (длина вытянутой цепи), что соответствует молекулярным массам от 200 до 5-10 . [c.549] Молекулярные сита — цеолиты [83,84]—представляют собой тип неподвил ных фаз, которые совмещают эксклюзию со специфическими адсорбционными свойствами. Эти вещества, являющиеся кристаллическими алюмосиликатами (обычно алюмосиликатами натрия или кальция), имеют жесткую, высоко однородную трехмерную пористую структуру со свободным объемом пор до 0,5 мл/г, образующихся при удалении кристаллизационной воды при нагревании. Известно большое число природных цеолитов [83], однако наибольшее практическое значение имеют синтетические цеолиты А, X и V. Цеолит ЫаА или 4А имеет поры размером около 0,4 нм цеолит СаА или 5А — поры размером 0,5 нм, а цеолиты X и У, обычно применяемые в натриевой форме, — поры размером около 0,9 нм. Молекулярноситовые эффекты чаще всего наблюдаются у цеолитов А цеолит 5А поглощает углеводороды с прямой цепью и не поглощает разветвленных молекул. Например, бутан можно отделить от изобутапа, поскольку последний из-за нелинейного строения не может проникнуть через малые поры. [c.550] Вернуться к основной статье