ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Методические указания по определению севина в биологических субстратах и воде методом тонкослойной хроматографии из "Методы определения микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде" Реактивы и расгворы. Спирт этиловый. Гексан х.ч. Хлороформ х.ч. Ацетон. X. ч. Прочный синий Б (или прочный красный ГГ). Кали едкое ч., х. ч. (15%-ный раствор на 60%-ном спирте). Натрий сернокислый безводный. Петролейный эфир ч., X, ч. Натрий хлористый. Уксусная кислота, 0,25 н. раствор. [c.162] Приборы и посуда. Хроматографические пластинки Силуфол , Камера хроматографическая, Чашки выпарительные фарфоровые. Вакуумный ротационный испаритель. Пульверизаторы стеклянные (химические). Химическая посуда (пипетки, воронки, воронки делительные, стаканы химические, колбы). [c.162] Подготовка к определению. Ткани внутренних органов тщательно измельчают ножницами или на гомогенизаторе. [c.162] Ход анализа. Экстракция и очистка экстракта из тканей животных (мышцы, печень, почки, легкие, сердце). К 2—3 г измельченной ткани приливают 5 мл гексана и прибавляют 2—3 г безводного сернокислого натрия. После этого ткани растирают пестиком и вместе с экстрагентом переносят в колбу для экстракции. Общий объем растворителя при этом должен составлять 30—50 мл. [c.162] При исследовании более крупных проб экстракт следует очищать от жиров и других мешающих определению севина веществ. Навеску ткани 5—20 г (или даже более) экстрагируют аналогичным способом, но с применением больших количеств растворителя. Сухой остаток после выпаривания смывают 20 мл метанола в делительную воронку, туда же добавляют 30 мл дистиллированной воды и 2—3 г хлористого натрия. Водно-спиртовой раствор 2—3 раза промывают петролейным эфиром. Затем севин дважды экстрагируют из водно-спиртового раствора 30—40 мл хлороформа. Далее хлороформ осторожно выпаривают в вакуумном ротационном испарителе или водяной бане с температурой не свыше бО С. Последние порции хлороформа нужно удалять особенно осторожно и только при легком подогревании. [c.163] Экстракция и очистка экстракта из мочи. Мочу разводят 0,25 н. уксусной кислотой (1 1 или 1 2) и экстрагируют. Пебо.чьшие порции мочи (до 5 мл) лучше экстрагировать хлороформом. Хлороформ выпаривают, сухой остаток смывают гексаном или метанолом и наносят на пластинки. [c.163] Экстракция и очистка экстракта из воды. Пробу воды 10—50 мл экстрагируют гексаном. Растворитель осторожно выпаривают до небольшого объема (0,5—1 мл) и наносят на хроматографические пластинки. [c.163] Хроматографирование. Сухой остаток после выпаривания растворителя смывают 1—0,5 мл гексана в пробирку и концентрируют слабым током теплого воздуха до необходимого объема. Затем весь раствор или его часть собирают микрошприцем или микропипеткой и наносят на хроматографические пластинки. [c.163] Хроматографирование проводят на стандартных пластинках Силуфол . Размер наносимого пятна не должен превышать 5 мм в диаметре. Точка старта расположена в 1,5—2 см от нижнего края пластинки. В качестве подвижного растворителя используют систему, состоящую из смеси гексана и ацетона (3 1). При такой системе растворителей Я севина и 1-нафтола колеблются в зависимости от серии пластинок и качества реактивов соответственно в пределах от 0,33 до 0,37 и от 0,51 до 0,58. После того как подвижный растворитель поднимется на 8—10 см, пластинки вынимают из камеры, высушивают на воздухе и опрыскивают 15%-ным раствором едкого кали в 60%-ном спирте для гидролиза севина. Пластинки вновь просушивают на воздухе и опрыскивают для проявления препарата и продукта его метаболизма 1-нафтола 0,2%-ным раствором соли прочный синий Б (или прочный красный ГГ), При этом на белом фоне проявляются четкие компактные пятна определяемых веществ в случае обработки пластинок солью прочный синий Б — красного цвета, а прочный красный ГГ — синего цвета. Окраска препарата стабильная и не теряет интенсивности в течение нескольких часов. [c.163] Вернуться к основной статье