ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Работа с образцами и их хранение из "Современное состояние жидкостной хроматографии" Старые образцы и бутылочки из-под образцов следует собирать в специальный контейнер и затем сжигать или зарывать в землю. [c.74] Детекторы, применяемые в жидкостной хроматографии, предназначены для непрерывного определения концентрации растворенного вещества в подвижной фазе на выходе из колонки. Выбор детектора имеет важное значение для аналитической жидкостной хроматографии. [c.75] В газовой хроматографии свойства газа-носителя, как правило, значительно отличаются от свойств исследуемого вещества. Поэтому пламенно-ионизационный детектор, детекторы по удельной теплопроводности или плотности могут непосредственно применяться для определения малых концентраций исследуемого вещества в газе-носителе. К сожалению, подвижная фаза в жидкостной хроматографии по физическим свойствам весьма схожа с исследуемым веществом. Поэтому для детектирования в жидкостной хроматографии необходимо или предварительно удалять растворитель (пла-менно-ионизационный детектор), или использовать такие свойства исследуемого вещества, на которые не влияет подвижная фаза (ультрафиолетовый детектор), или измерять одно из общих физических свойств раствора в последнем случае необходимы тщательная компенсация различий и температурный контроль (рефрактометрический детектор). Единого универсального детектора для жидкостной хроматографии не существует, но для каждого конкретного случая можно подобрать наиболее подходящий детектор. Не создан и такой детектор, который бы измерял сразу несколько физических свойств, но в случае необходимости можно использовать ряд детекторов. [c.75] И детекторы по радиоактивности. При анализе следов веществ для детекторов первого типа необходима компенсация и тщательное термостатирование. Детекторы первого типа обычно менее чувствительны и более подвержены шумам и дрейфу, что связано с трудностями контроля температуры в требуемом диапазоне значений. [c.76] Наиболее широкий диапазон применения имеют ультрафиолетовый и рефрактометрический детекторы, и они применяются чаще других. [c.76] Система, в которой используется поглощение в УФ-области (обычно 254 и 280 нм), является одной из наиболее чувствительных в жидкостной хроматографии с ее помощью можно детектировать нанограммовые количества образца веществ, сильно поглощающих в диапазоне измеряемых длин волн. Ультрафиолетовые детекторы просты в эксплуатации и сравнительно мало чувствительны к изменениям скорости потока и температуры. При использовании детектора этого типа образец, очевидно, должен поглощать при детектируемой длине волны. [c.76] Дифференциальный рефрактометр используется для работы с образцами, которые не поглощают в ультрафиолетовой области. Он также довольно прост в применении и позволяет детектировать микрограммовые количества вещества. Однако дифференциальный рефрактометр чувствителен к изменению температуры и скорости потока. [c.76] Обычно прежде чем выбрать детектор, наиболее подходящий для данного исследования, приходится знакомиться с большим числом паспортных данных из разных источников, причем для каждого детектора дается свой набор параметров. В этом случае целесообразно иметь какие-то общие характеристики, чтобы по ним можно было выбрать подходящий детектор. В настоящее время для получения необходимой информации о применимости детекгора необходимо или найти в литературе пример аналогичного использования, или опытным путем определить, насколько пригоден данный детектор для анализа исследуемого вещества. [c.76] Перечислим основные параметры детектора. 1. Шумы короткопериодический, длиннопериодический, дрейф нуля. 2. Чувствительность абсолютная, относительная по образцу. 3. Линейность. [c.76] Кроме того, есть и другие рабочие параметры, которые также должны быть известны или исследованы это дрейф базовой линии при изменении скорости потока изменение чувствительности со скоростью потока зависимость чувствительности детектора от температуры комнаты чувствительность детектора к изменению температуры подвижной фазы мертвый объем и уширение в кювете и в подводящих трубках простота в эксплуатации. [c.76] В таблице приведены значения некоторых параметров для ряда детекторов. [c.76] Шумы определяются как изменение в выходном сигнале детектора, которое не может быть приписано веществу, проходящему через кювету. Шумы могут возникать в процессе работы прибора вследствие флуктуаций температуры, колебания напряжения в сети, изменения скорости потока в кювете и т. д. При сравнении приборов очень важно сравнить экспериментальные условия, при которых получены параметры детектора. [c.77] Абсолютная чувствительность детектора — это обшее изменение физического параметра, приводяшее к отклонению самописца на всю шкалу при максимальной чувствительности детектора с определенным значением шумов. При сравнении детекторов чувствительность определяют при равных значениях шумов. Чувствительность можно также определить как величину сигнала, равную шумам. Обычно предполагается, что для детектирования необходимо, чтобы величина сигнала по крайней мере в 2 раза превышала значение шумов. Так, если шумы детектора составляют 2%, то минимально детектируемый образец будет вызывать сдвиг сигнала в 4%. Как правило, для определения абсолютной чувствительности непосредственно в детектор вводятся стандартные растворы с известными свойствами. [c.78] Относительная чувствительность по образцу определяется как минимальная концентрация исследуемого вешества, которая может быть детектирована. В соответствии со сказанным выше это та концентрация, при которой сигнал в 2 раза превышает шумы. [c.78] Для определения относительной чувствительности для данного образца детектор необходимо поместить в жидкостную хроматографическую систему с насосом, системой ввода проб, колонкой и т. д. Система работает при постоянных скорости потока, температуре и других экспериментальных условиях. Минимально детектируемое предельное количество можно определить путем последовательного введения в хроматограф известных уменьшающихся концентраций образца. Сигнал многих детекторов первого типа зависит от свойств растворителя, так как он определяется разницей в свойствах растворителя и исследуемого вещества (например, показатель преломления), поэтому чувствительность будет меняться с изменением природы растворителя. Колонка и мертвый объем хроматографической системы приводят к уширению сигнала, что увеличивает минимальный размер образца, который может быть детектирован. Необходимо учитывать, что чувствительность некоторых детекторов (например, полярографического) зависит от скорости потока. [c.78] Средняя концентрация в кювете при предельно минимальном детектировании может быть приблизительно получена делением начального веса образца на объем подвижной фазы, проходящей в период выхода пика (время, за которое выходит пик, умножается на скорость потока). Концентрация в пике приблизительно равна двойной средней концентрации. Чтобы при прохождении через детектор уширение пика было минимальным, объем кюветы должен быть значительно меньше (приблизительно на два порядка), чем объем подвижной фазы в пике. [c.78] Основным требованием, предъявляемым к детектору, который измеряет концентрацию растворенного вещества на выходе из колонки, является пропорциональность сигнала концентрации растворенного вещества. Во всех детекторах, используемых в жидкостной хроматографии, приближенно это требование выполняется, но ни в одном из них указанная зависимость не является линейной во всем диапазоне концентраций, где возможно детектирование (данные таблицы характеризуют верхний предел линейности для каждого детектора). Наиболее распространены два метода определения линейности. [c.79] Во втором методе линейность определяется как максимальное отклонение (в процентах) от линейности во всем диапазоне концентраций и выражается как процент от отклонения на всю шкалу. [c.79] Вернуться к основной статье