ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Гистохимические анализы из "Применение поглощения и испускания рентгеновских лучей" Малые длины волн рентгеновских лучей вызывают естественные затруднения при фокусировке. С другой стороны, электроны довольно легко поддаются сведению в пучок сечением в несколько микронов, и этот факт положен в основу работы микроанализаторов (см. 9.9). Само собой разумеется, что концентрированный электронный пучок, бомбардирующий одну сторону подходящей тонкой мишени, порождает на другой ее стороне рентгеновское пятно , и это пятно можно считать достаточно малым, чтобы рассматривать его в качестве точечного источника рентгеновских лучей. [c.308] Мы хотим повторить здесь предостережение, сделанное в конце раздела 9.9. Точечный источник, там, где он действительно нужен, является очень удобным. Если же, однако, применять го без острой необходимости, то легко получить ошибочную информацию о среднем составе образца, который может быть очень неоднородным. Сочетание сканирования с микрозондом сможет дать информацию о среднем составе. [c.309] Такие острофокусные трубки были разработаны для проекционной рентгеновской микроскопии (см. ниже). Они были использованы также для дифференциальной абсорбциометрии по обе стороны от края поглощения (см. 5.4), как показано на рис. 110. В этой схеме образец помещается прямо против точечного источника рентгеновского характеристического излучения, а его увеличенное изображение после отражения от изогнутого анализирующего кристалла проектируется на окно пропорционального счетчика. Длины волн, возбуждающие образец, определяются материалом использованной мишени, и для каждой задачи они могут быть подобраны специально. Ошибки, создаваемые дрейфом источника рентгеновского излучения, исключаются небольшим равномерным и частым покачиванием кристалла таким образом, что от него отражаются лучи двух длин волн, расположенных по обе стороны от края поглощения. С помощью такой схемы было выполнено определение кальция на участке диаметром 10 juk в срезе биологического объекта. Надежность результатов составляет несколько процентов от найденного количества кальция на площади указанного размера (2-10 г и даже меньше). [c.309] Была также разработана аппаратура, позволяющая заменить металлический анод в рентгеновском микроанализаторе на прозрачный кристаллический или минеральный образец (см. 9.9). [c.310] Положение излучающего пятна можно тогда наблюдать визуально, рассматривая образец через обычный оптический микроскоп. [c.310] Наконец, с помощью острофокусных трубок [286] может быть поставлен целый ряд работ по рентгеноструктурному анализу как при работе на прохождение, так и методами обратной съемки. Эти вопросы выходят за рамки настоящей книги. [c.310] Как уже отмечалось, такие острофокусные рентгеновские трубки первоначально разрабатывались для проекционной рентгеновской микроскопии [284]. Этот метод необходимо отличать от настоящей рентгеновской микроскопии, в которой изображение формируется дифракцией или отражением рентгеновских лучей. [c.310] В проекционной же микроскопии рентгеновский пучок, расходящийся от точечного источника, проходит сквозь образец, как это видно из рис. 110, и образует геометрически увеличенное изобра-жедие, попадая на фотопленку или фотопластинку, находящуюся на определенном расстоянии от образца. Для получения дальнейшего увеличения можно воспользоваться обычными оптическими приемами. Одно из самых важных преимуществ описанной методики состоит в том, что изучаемый образец находится в воздухе, а не в вакууме, как в электронной микроскодии. Это особенно важно в тех исследованиях, которые изучают процессы жизни, когда высушивание образцов (в вакууме) может привести к нежелательным изменениям. [c.312] Рентгеновский микроскоп фирмы General Ele tri (рис. Ill) выполнен в виде оперативного стола и весит вместе с механическим насосом около 135 кг. Внутри находится высоковакуумная система, электроннооптическая система и источник питания. Пульт управления и фотокамера видны на рисунке. Удобным узлом прибора является манипулятор, позволяющий производить перемещение образца в трех взаимно-перпендикулярных направлениях и получать пространственное представление об образце. Блок автоматического проявления, встроенный в фотокамеру микроскопа, позволяет наблюдать результаты спустя 1 мин после окончания экспозиции. Полное увеличение (включая и оптическое) достдгает 1500. Такое увеличение достигается и в оптическом микроскопе. Электронный микроскоп позволяет получать и гораздо большие увеличения. [c.312] Обычная мишень представляет собой бериллиевое окно с напыленной металлической, чаще всего вольфрамовой пленкой, рентгеновский спектр от которой необходимо получить. При ис-пользованди вольфрама этот метод может рассматриваться как модификация метода абсорбциометрии при полихроматическом излучении (гл. 3). Рис. 112 дает представление о возможностях этого микроскопа. [c.312] Острофокусная электронно-оптическая система описанного здесь микроскопа была дспользована в качестве основы для создания рентгеновского микроанализатора 287, 288]. [c.312] Указанным задачам свойственны некоторые общие черты. Поле действия оператора ограничено сравнительно небольшими размерами срезов биологических тканей, имеющих ширину порядка нескольких микронов. Это делает целесообразным применение для регистрации рентгеновского излучения фотопластинок, позволяющих выполнить измерения интенсивности по большой площади увеличенного изображения. Ввиду того что в таких пробах представлены главным образом легкие элементы, должны использоваться рентгеновские лучи с большими длинами волн. Это, в свою очередь, требует тонких образцов и вакуума в объеме прибора на пути прохождения рентгеновских лучей от образца до пластинки. И, наконец, для работы в вакууме образцы должны быть сухими. [c.313] Среднее значение сухого веса (3,95 0,20) 10 ° г согласуется с данными микрохимического анализа образцов, состоявших дз множества клеток. Разумеется, такие методы анализа не могут обнаружить изменения веса отдельных клеток, подобных приведенным в табл. 47. [c.316] МоЬ(31 (край поглощения около 5,0 А). [c.317] Надежность результатов можно оценить по следующим данным. В срезах биологических объектов толщиной около 10 мк абсолютные ошибки в определении лежат между 0,15 и 0,2 пг на 1 мк для кальция от 0,06 до 0,1 пг на 1 мк для фосфора и серы. Этим абсолютным ошибкам, как правило, соответствует относительная ошибка, не превышающая 5% от количества элемента, присутствующего в образце. [c.317] Получение столь надежных результатов от очень малых образцов дает возможность обнаружить изменения химического состава биологических объектов при переходе от одного малого участка к другому. Полученные таким путем данные, будучи сопоставленными с данными по сухому весу (для получения которых использовался метод абсорбциометрии в полихроматических пучках), позволяют сделать некоторые заключения, приведенные в виде примера в табл. 48. [c.317] Ввиду сложности биологических тканей данные рентгеновских исследований необходимо дополнять данными, полученными другими методами. Ряд выполненных в последнее время работ позволяет надеяться на известный успех при совместном использовании различных аналитических подходов [290—295]. [c.318] Вернуться к основной статье