ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Колориметрия из "Практическая биохимия" Колориметрия имеет очень широкое применение в биохимическом анализе. Осно ывается она на сравнении окраски стандартных растворов с окраской, получающейся при взаимодействии каких-либо веществ, содержащихся в крови, или моче, или экстракте ткани, с определенными реактивами. [c.71] Компаратор (рис. 7) применяется обычно тогда, когда сравнение цветов, развивающихся в результате данной реакции, затруднено собственной окраской жидкости. Он представляет собой кусок плотного дерева, в котором высверлены 6 вертикальных, не доходящих до нижней поверхности каналов одинакового диаметра, подходящего для калибра пробирок, в которых будет вестись определение. Каналы расположены попарно, один сзади другого. [c.71] В нижней части компаратора, но не у самого конца каналов просверлены три горизонтальных отверстия, несколько меньщего диаметра каждое из них проходит через всю толщу компаратора, так что можно смотреть насквозь. Сзади отверстий часто ставят кусок матового или какого-нибудь цветного стекла, что иногда облегчает анализ, заменяя сравнение интенсивности окраски сравнением оттенка, что гораздо легче. [c.71] Компаратор, Цифрами обозначены вертикальные каналы буквами — горизонтальные. [c.71] Иногда бывает удобнее пользоваться сравнением окраски раствора с серией стандартных растворов. Это существенно в случаях, когда требуется большая скорость определения, в силу быстрого изменения цвета (выцветание), или когда имеется различие не только в интенсивности, но и в оттенке окраски, как, например, при определении pH крови (см. стр. 305). [c.72] Измерение интенсивности окраски по методу стандартных серий выполняется обычно следующим образом. Отбирают про- бирки одинакового диаметра и цвета, наливают в них точно отмеренное одинаковое количество воды. Те пробирки, где уровень воды одинаков,— годятся, остальные для этой работы не подходят. Воду выливают, пробирки моют, сушат, разливают в них постепенно возрастающие количества стандартного раствора определяемого вещества и разбавляют до одинакового объема. Далее во все пробирки прибавляют одинаковые количества реактивов и проделывают все операции, необходимые для превращения определяемого вещества в окрашенное соединение. На пробирки наклеивают этикетки, указывающие содержание в них вещества. Анализируемый раствор в такой же пробирке подвергают аналогичной обработке, доводят до того же объема и ищут, какая из стандартных пробирок совпадает по цвету с пробиркой с анализом. [c.72] Удобно для сравнения поставить стандартный ряд пробирок в один длинный штатив, приколов сзади лист белой фильтровальной бумаги. Тогда, при передвижении пробирки с анализом вдоль шкалы, очень хорошо заметно, с какими пробирками шкалы наиболее сходно окрашивание в ней. [c.72] Если концентрация выражена в молях на литр, а толщина слоя в см, то /г становится молярным или молекулярным коэффициентом экстинкции, который обычно обозначают буквой е. [c.73] Окраска какого-либо вещества вызывается неравномерным поглощением света разных длин волн в нем, и цвет обусловливается теми волнами, которые это вещество пропускает. [c.73] Вернуться к основной статье