ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ МОРФОФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ АНАЛИЗОВ РАСТЕНИЙ из "Биологический контроль в защите растений" Биологический контроль складывается из подбора растений в пробы, регистрации их, описания строения растений, определения этапов органогенеза и из оформления документации. [c.5] Для биологического контроля берут растения, состояние и фаза развития которых типичны для посева и отражают развитие большинства растений. [c.5] На мелкоделяночных опытах берут по 3—5 растений с делянки в разных ее частях. При 3 повторностях в опыте пробы берут на каждой повторности, при 4—6 повторностях пробы следует брать на каждой второй. [c.5] На полях размером до 50 га достаточно взять 10 проб — по 5 проб на каждой из двух диагоналей (по 5 растений в одной пробе) на поле размером от 50 до 100 га берут 16 проб, по 8 проб на диагонали на каждые последующие 100 га добавляют по 3—5 проб на каждой диагонали, в зависимости от выров ненности рельефа поля. [c.5] В том случае, когда нет возможности провести анализы сразу после взятия проб, растения консервируют разными способами. [c.5] Растения в ранние фазы развития (от всходов до трубкова-ния) могут стоять в воде при комнатной температуре до 12 часов. Растения на VI—IX этапах органогенеза стоять в воде долго не могут, их лучше анализировать сразу. [c.6] Сохранять растения свежими в течение нескольких дней (до 3—5) можно и в холодильнике при температуре+2—5°, но у растений на VI—VIII этапах органогенеза иногда наблюдаются некоторые изменения. [c.6] Существует несколько способов постоянной консервации (фиксации) растений. Наиболее распространенный метод — доведение растений до воздушно-сухого состояния, при котором срок анализа можно отодвинуть на несколько месяцев. Растения высушивают при комнатной температуре или в сушильном шкафу при температуре не выше 50°, в процессе сушки следят за сохранением целостности растений и не допускают их плесневения. Высушенные растения можно долго хранить и легко транспортировать. [c.6] Перед анализом восстанавливают эластичность растений и нормальную форму конуса нарастания. Используется способность протоплазмы клеток к обратимой гидратации (поглощение воды клетками). Упругость тканей восстанавливают кипятком. Засушенные растения перед самым анализом бросают в кипящую воду и кипятят около 10—15 минут, вынимают из воды и анализируют. Растение перестает быть ломким, и становится возможным определить фазу, число и разм ы развития органов. Конус нарастания особенно хорошо сохраняет упругость тканей и свою истинную форму. [c.6] Консервация растений путем высушивания широко применяется при массовых анализах, когда растительные пробы в воздушно-сухом состоянии пересылаются в определенные центры. [c.6] Хранить пробы можно и в фиксирующих жидкостях в растворе 4—6-процентного формалина, в смеси из 6—9 частей 70-процентного спирта и 4—1 частей 4—6-процентного формалина. [c.6] Для анатомических и гистохимических анализов растения консервируют в жидких фиксаторах. Лучшим фиксатором конусов нарастания у растений на I—VI этапах органогенеза является смесь из 6,5 части уксусной, а лучше пропионовой кислоты, 10 частей 40-процентного формалина и 83,5 части этилового 70-процентного спирта. [c.6] Перед консервированием описывают фазу растения, число развитых органов и их размеры составляют схему строения растений с обозначением на ней участков, откуда взяты почки для фиксации. [c.6] До V этапа растения можно консервировать целиком, если они не слишком большие, а с VI этапа органогенеза крупные Цветки отделяют от оси конуса нарастания и фиксируют отдельно. Начиная с VIII этапа органогенеза отдельно фиксируют тычинки и пестики. [c.7] Почки и конусы нарастания крупных размеров можно фиксировать в кусочках марли мелкие органы помещают в маленькие пробирки минутки — объемом 3—5 мл. В пробирки наливают фиксатор, закрывают плотно ватным тампоном и ставят вместе с другими пробирками в банку с притертой пробкой, наполненную тем же фиксатором. [c.7] Зафиксированный материал сразу заливают парафином, ИЭТ определяют на микротомных (очень тонких) срезах препараты окрашивают метиленовой синькой и кислым фуксином в буферных смесях. [c.7] Гистохимические реакции в меристеме по определению дыхательных ферментов, состава углеводов, белков, жиров и т. д, проводят на законсервированном материале и микротомных срезах. Гистохимические реакции можно изучать на всех 12 этапах органогенеза. [c.7] В поле каждая проба растений снабжается этикеткой в ней простым карандашом записывается дата взятия образца, вид и сорт растения, фаза его развития, название опыта, номер варианта, поля и севооборота, номер пробы и цель анализа, если имеется в виду проводить несколько различных анализов (на определение зараженности вредителями, гистохимические анализы и т. д.). [c.7] Перед анализом в лаборатории все сведения с этикеток переносят в журнал. Когда растения анализируют после их консервации, то на этикетках и в журнале указывают, какой фиксатор применяли. [c.7] Вернуться к основной статье