ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Высокоэффективная жидкостная хроматография из "Практикум по физико-химическим методам анализа" Современная высокоэффективная жидкостная хроматографии ВЭЖХ (жидкостная хроматография высокого давления, скоростная жидкостная хроматография) начала развиваться в начале 70-х годов. Разработка нового метода обусловливалась, во-первых, необходимостью анализа высококипящих ( 400 °С) или неустойчивых соединений, которые не разделяются методом газовой хроматографии, во-вторых, необходимостью увеличить скорость разделения и повысить эффективность метода колоночной жидкостной хроматографии. Для этого применили колонки с малым внутренним диаметром (2—6 мм) для ускорения массообмена уменьшили диаметр частиц сорбента (5— 50 мкм), что, в свою очередь, привело к необходимости увеличить давление на входе колонки до 0,5—40 МПа. Выпускаемые промышленностью жидкостные хроматографы снабжены высокочувствительными детекторами, позволяющими определять до 10 —10 ° г вещества. Достаточно высокая скорость анализа, низкий предел обнаружения, высокая эффективность колонки, возможность определять любые вещества (кроме газов) привели к быстрому развитию ВЭЖХ. [c.203] В ВЭЖХ могут быть реализованы почти все механизмы разделения, применяемые в хроматографии (адсорбция, распределение, ионный обмен и др.). Независимо от механизма разделения, подвижная фаза в ВЭЖХ — жидкость. Остановимся на жидкостно-адсорбционной хроматографии, которая широко представлена в двух вариантах нормально-фазовая (НФХ) и обращенно-фазовая (ОФХ)—в зависимости от полярности подвижной и неподвижной фаз. [c.203] В НФХ используют полярный адсорбент (например, силикагель), элюент — неполярный (гексан), разделяемые вещества — полярные. В ОФХ применяют, как правило, адсорбент неполярный (силикагель с привитыми на его поверхности алкильными цепями (Сб—С18), элюент полярный (спирты, вода) разделяемые вещества — любые. [c.203] Для практического разделения достаточно, чтобы исследуемое вещество удерживалось в колонке в 2—10 раз сильнее, чем неудерживаемое вещество. [c.203] Число теоретических тарелок колонки рассчитывают по уравнению (3.3). Число теоретических тарелок в ВЭЖХ может достигать 10 , что приводит к высокой эффективности колонок. [c.203] Колонки во всех хроматографах представляют собой стальную трубку с внутренним диаметром 4—6 мм и длиной 100— 250 мм. Повышенное давление на входе в колонку вызывает необходимость применения укороченных колонок по сравнению с колонками, применяемыми в газовых хроматографах. Образец вводят микрошприцем. [c.204] Наибольшим достоинством жидкостной хроматографии является градиентное элюирование — изменение состава элюента во времени, позволяющее разделять смеси различной полярности за счет изменения коэффициента распределения. Градиентное элюирование можно рассматривать как аналог программирования температуры в газовой хроматографии. [c.204] Состав элюата непрерывно контролируют детектором. Детекторы в жидкостных хроматографах можно объединить в следующие группы 1) оптические детекторы, составляющие около 92% всех применяемых детекторов (абсорбционные, люминесцентные, рефрактометры) 2) электрохимические детекторы (потенциометрические, по электропроводности, амперометрические и др.) 3) другие детекторы (транспортные, газовые, микроад-сорбционные). [c.204] Предлагаемые ниже лабораторные работы могут быть вы-лолнены на любом жидкостном хроматографе отечественного или зарубежного производства. Хорошо себя зарекомендовали жидкостные хроматографы серии Цвет-300 Цвет-3000 , выпускаемые Дзержинским филиалом ОКБА объединения Хим-автоматика . [c.204] Включение хроматографа и вывод его на рабочий режим осуществляют согласно инструкции для конкретной марки прибора. [c.204] Вернуться к основной статье