ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Общие данные из "Химия и биология белков" Молекулярный вес низкомолекулярных веществ можно определить, растворив эти вещества в подходящих растворителях и измерив наступившее в результате растворения понижение точки замерзания растворителя, повышение его точки кипения или уменьшение давления пара. Удовлетворительные величины получаются при помощи этих методов в тех случаях, когда концентрация растворенного вещества оказывается не ниже 0,01—0,1 М. Для белков, однако, эти методы неприменимы, так как практически невозможно приготовить 0,01 М раствор белка с молекулярным весом, равным 100 000. Такой раствор должен был бы содержать I ООО г белка в 1 л. [c.47] Правда, некоторые белки, например ряд альбуминов, хорошо растворимы, и не представляет труда приготовить их растворы, содержащие 300 г белка на 1 л воды или более. Однако и в этих случаях трудно использовать указанные растворы для определения молекулярного веса белков, так как они обычно содержат следы загрязнений низкомолекулярными веществами, которые могут оказать громадное влияние на результаты определений. Так, например, 1 мМ углекислоты и 1 мМ сывороточного альбумина в равной степени снижают точку замерзания воды, между тем вес 1 мМ углекислоты составляет всего только 0,044 г, а вес 1 мМ сывороточного альбумина — 68 г. [c.47] Такие же ошибки, зависящие от наличия загрязнений, возможны и в опытах, в которых молекулярный вес белков определяется по повышению точки кипения или по понижению давления пара растворителя. Из сказанного ясно, что для определения молекулярного веса высокомолекулярных соединений, подобных белкам, необходимо использовать другие методы. [c.47] Таким же путем, по содержанию некоторых аминокислот, были рассчитаны минимальные молекулярные веса р-лактогло-булина, сывороточного альбумина [1], эдестина [2] и других белков. Хотя подобный химический анализ не дает возможности определить истинные молекулярные веса, а лишь позволяет судить о минимальной их величине, он все же может оказаться очень полезным, в особенности если различные определения (по различным составным частям молекулы) дают одно и то же значение минимального веса. [c.48] Физико-химические методы, используемые для определения молекулярного веса белков, основаны на различных принципах и иногда дают сильно отличающиеся друг от друга результаты, толкование которых часто затруднительно и даже не всегда возможно. Это связано с тем, что результаты измерений зависят не только от величины и массы белковых молекул, но также и от их электрического заряда и формы. Последний фактор, в частности, имеет существенное значение в тех случаях, когда определяют скорость движения молекул, например скорость диффузии или скорость оседания в гравитационном поле. В то время как шарообразные молекулы в подобного рода опытах ведут себя закономерно, удлиненные нитевидные молекулы фибриллярных белков обнаруживают аномальное поведение. Отклонение от шарообразной формы приводит к увеличению коэффициента трения и соответственно — к снижению скорости диффузии. При определениях в концентрированных растворах, содержащих нитевидные молекулы, возникают и другие осложнения, зависящие от взаимных столкновений и временных связей молекул друг с другом. На результаты, полученные динамическими методами, влияет также гидратация частиц, поскольку движение молекул через растворитель будет замедлено, если поперечник их увеличится за счет гидратации. [c.48] Вернуться к основной статье