ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Кинетика ферментативных реакций из "Химия и биология белков" Постоянная К,,, носит название постоянной Михаэлиса. Если К, =[5], то [Е5] = [Еоб]/2, т. е., другими словами, скорость реакции равна половине максимальной скорости реакции, протекающей в присутствии большого избытка субстрата, когда [Е5] [Еоб ]. Это уравнение используется для определения Кт путем измерения скорости реакции при различных концентрациях субстрата. Постоянная Михаэлиса К, ) соответствует такой концентрации субстрата 5, при которой скорость реакции равна половине максимальной величины. [c.284] Из уравнения (3) следует, что [Е5] зависит от Кт и от [5]. Если в состоянии равновесия [Е5] будет бесконечно малой величиной по сравнению с [5] и с [Еоб ], то скорость реакции будет зависеть только от [8]. В этом случае при низких концентрациях субстрата эта реакция будет протекать по типу реакций первого порядка. Если же практически все количество фермента окажется связанным с субстратом в виде Е5 и если концентрация субстрата будет достаточно высока, то концентрация фермент-субстратного комплекса не будет меняться и скорость такой реакции окажется постоянной. В этом случае мы имеем дело с реакцией нулевого порядка [36]. Большинство ферментативных реакций не являются, строго говоря, ни реакциями первого, ни реакциями нулевого порядка, а протекают согласно некоему промежуточному порядку [34, 36, 37]. Это зависит отчасти от уменьшения концентрации субстрата в течение реакции, а отчасти от образования различных типов фермент-субстратных соединений. Так каталаза и пероксидаза, как уже указывалось выше, образуют зеленые и красные комплексы с субстратом, причем скорости распада зеленого и красного комплексов различны [32, 33]. Дальнейшие усложнения возникают вследствие соединения фермент-субстратных комплексов с водородными ионами [38] или с другими ионами или молекулами. Так, например, скорость гидролиза яичного альбумина пепсином зависит от концентрации водородных ионов раствора реактивным промежуточным соединением является в этом случае не Е5, а Н+Е5 [38]. Если в образовании фермент-субстратного соединения участвуют ионы, то скорость катализируемой реакции зависит от диэлектрической постоянной растворителя известно, что органические растворители, например метиловый или этиловый спирт, уменьшают диэлектрическую постоянную раствора и степень ионизации,вследствие чего уменьшается скорость катализируемой реакции [39]. [c.284] Если раствор содержит вещества, способные соединяться с ферментом, то между этими веществами и субстратом возникнет конкуренция за соединение с ферментом. Поэтому эти вещества будут действовать как ингибиторы. Для изучения кинетики ферментативных реакций в присутствии ингибиторов служат те же расчеты, какими мы пользовались при изучении кинетики реакции образования фермент-субстратного комплекса [40]. Напомним, что ферментативный гидролиз сахарозы инвертазой тормозится одним из продуктов реакции, а именно фруктозой (см. стр. 281), которая в этом с.яучае действует как ингибитор. [c.285] Различные ингибиторы реакции образования фермент-суб-стратного соединения (например, ионы, растворители, продукты реакции и др.) часто вызывают отклонение скорости ферментативной реакции от теоретической величины, вычисленной из уравнения( 3). [c.285] Вернуться к основной статье