ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Вопросы из "Нуклеиновые кислоты и биологическое действие ионизирующей радиации" Спитковский. Я уже отмечал, что облучению подвергали растворы именно той концентрации, которая является оптимальной для последующего получения ДНП-нити, т. е. 0,025—0,05%, в зависимости от задачи эксперимента. В этом случае последующее за облучением переосаждение и вторичное растворение ДНП не приводило к восстановлению способности ДНП образовывать ориентированные структуры. Таким образом, можно, вероятно, говорить о стойких нарушениях. Вместе с тем, по-видимому, действительно целесообразно подвергнуть облучению более разбавленные растворы с тем, чтобы после их соответствующей концентрации попытаться получить конденсированные структуры. После проведения таких экспериментов я смогу более обстоятельно ответить на этот очень интересный и важный вопрос. [c.25] Спитковский. Специально этот вопрос не исследовали. Однако ввиду того, что определение количества одиночных разрывов связано с получением однотяжевой ДНК, в некоторых экспериментах концентрация облучаемых растворов, по ряду соображений, отличалась в полтора-два раза. В этом случае мы не наблюдали достоверной концентрационной зависимости. [c.25] Спитковский. Ответ на этот вопрос мне кажется целесообразно разбить на две части. [c.25] Во-вторых, как я уже отмечал, величина оптического вращения ДНП падает после облучения дозой 5000— 10000 р. В то же время этот параметр у ДНК остается неизменным вплоть до доз 5 10 р. Если бы при действии радиации происходила только диссоциация нуклеопротеидного комплекса, то в противоположность наблюдаемому эффекту можно было бы ожидать увеличения вращения. Механизм найденного феномена еще недостаточно ясен, однако он позволяет заключить, что по этому критерию ДНП значительно более радиочувствителен, чем ДНК. Этим примером я еще раз хочу подчеркнуть относительность понятия радиочувствительность . Несомненно, что этот критерий непосредственно связан с методом его определения. [c.26] Спитковский. По данным Григоровича, полученным при облучении обезьян и мышей, такая корреляция существует. Наши данные в этой области связаны с облучением не животных, а ядер и с последующим выделением ДНП. Я бы сегодня воздержался от ответа на этот вопрос, так как эксперименты в данной области еще не закончены. [c.26] Вопрос. Нельзя ли связать высокую радиочувствительность ДНП с ионом хлора Я имею в виду данные, которые приводил Александер о влиянии хлора на радиочувствительность. [c.27] Спитковский. Ввиду того, что механлзм высокой радиочувствительности надмолекулярных ДНП-структур недостаточно ясен, любые разумные механизмы следует принимать во внимание. Однако я не думаю, что это именно тот механизм. [c.27] Спитковский Нет, не имеется в виду. Деполимеризация возможна, если разрыв в одной цепи будет сдвинут относительно разрыва во втором тяже ДНК на несколько нуклеотидов. [c.27] Спитковский. Если имеется в виду радиочувствительность связей, то да, поскольку одни связи радиочувствительнее других. На этом обстоятельстве мы останавливались в докладе. Однако такие связи существуют в пределах каждого мономера ДНК и накопление осколков ДНК носит чисто статистический характер. [c.27] Цейтлин. Если взять строго монодиоперсные по молекулярному весу линейные полимеры, то возникновение пяти-шести разрывов уже приводит к тому, что распределение становится статистическим. [c.27] Спитковский. Я думаю, что во всех случаях, когда облучению подвергались концентрированные растворы ДНП, данные более или менее коррелируют друг с другом, конечно, по разным тестам и по степени достоверности. Я думаю, что здесь нет смысла напоминать об очень интересных работах А. М. Куз.ииа, А. Г. Пасынского и других, где также по другим тестам была показана высокая радиочувствительность этих объектов. [c.27] Спитковский. В свое время Спиноза писал что знание действия зависит от знания причины и заключает в себе последнее. Если бы мы зна ли, в каком состоянии нуклеопротеид находится в клетке, мы имели бы критерий нативности нуклеопротеида. Выделяя нуклеопротеиды разными методами и исходя из свойств уже выделенных нуклеопротеидов, мы спорим о том, какой нуклеопротеид нативнее. Это, с нашей точки зрения, достаточно схоластический спор. В связи со сказанным, сравнивая известные немногочисленные данные о физико-химическом поведении и строении хромосом с ДНП-структурами при физиологической ионной силе среды, я считаю, что последние наиболее адекватно отражают свойства внутриядерных нуклеопротеидов и по этому критерию нативны. Если еще раз вернуться к очень важному вопросу о методах выделения ДНП, то, на основании сказанного я считаю, что наиболее нативные ДНП позволяет получить солевой метод, где величина ионной силы определяется минимумом концентрации соли, необходимой для растворения наиболее поли.черной фракции ДНП. [c.27] Вопрос. Я напомню работу Даунса,. где приводятся данные о радиочувствительности ДНП, выделенных в воде. В этом случае тип связи иной, чем в солевом растворе. Однако эти пре параты оказались чрезвычайно радиочувствительными даже при облучении ядер. [c.28] На уровне первичной структуры ДНК можно выделить две группы радиационно-химических реакций. Первая группа объединяет реакции, связанные с повреждением оснований, последовательность которых определяет специфичный генетический код ДНК. Эти реакции, приводящие к потере отдельных оснований или к замене одних оснований другими, мы объединяем под общим названием декодирования ДНК. Вторая группа объединяет реакции, связанные с повреждением углеводной части ДНК — дезоксирибозы, участвующей в образовании продольных фосфоэфирных связей. Эти реакции, приводящие к одиночным и двойным разрывам продольных связей непосредственно при облучении или по прошествии некоторого времени после облучения, мы объединяем под общим названием деполимеризации ДНК. [c.28] Важно отметить, что пиримидиновые основания более радиочувствительны, чем пуриновые. Выход разрушения пиримидиновых оснований — тимина и цитозина — близок к 3, тогда как хромофоры аденина и гуанина разрушаются с выходом меньше одной молекулы на 100 эв. Отношение 3 1 для выходов разрушения хромофоров пиримидиновых и пуриновых оснований впервые было получено в опытах со свободными основаниями. Оказалось, что это соотношение сохраняется и в ДНК. [c.29] Как необратимую потерю тимина в цепи ДНК можно рассматривать превращение его в гидроперекись (только в присутствии кислорода) с выходом, равным примерно одной молекуле на 100 эв (около 30% выхода разрушения хромофора). [c.29] Весьма примечательно то, что выход гидроперекиси при облучении ДНК оказался равным (с точностью до десятых долей) выходу гидроперекиси при облучении свободного тимина (1,1 молекулы/100 эв). Это позволяет думать, что гидроперекись при облучении ДНК образуется только за счет тимина, так как ни пуриновые основания, ни цитозин гидроперекисей не дают. [c.29] Вернуться к основной статье