ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Окисление тионфосфатов тканями млекопитающих из "Токсичные эфиры кислот фосфора" Способность препаратов печени активировать паратион полностью исчезала после ее гомогенизации, и это явление существенно задержало дальнейшее изучение активирующей системы. Дейвисон [29] нашел, что активирующая способность гомогенатов печени крысы может быть восстановлена путем добавления магния и ДПН (дифосфопиридиннуклеотида) вместе с никотинамидом точно так же, как это наблюдалось при активировании шрадана. Активность обработанных таким образом гомогенатов была сосредоточена только во фракции микросом и надосадочной жидкости. Каждая из этих фракций сама по себе обладала некоторым действием, но полное активирование паратиона достигалось только при совместном применении обеих фракций. Различные гуггибиторы влияли на эту систему так же, как и на систему активирования шрадана, описанную выше. [c.167] Таким образом, в работах исследователей- трех главных групп имеется немало противоречий. В настоящее время критическая оценка этих данных затруднительна, так как условия опытов в различных экспериментах слишком отличались друг от друга. Необходимо, чтобы одна из групп авторов (желательно, чтобы это была четвертая группа ) тщательно изучила эти противоречия с помощью стандартной ферментной системы и с одновременным изучением ее действия на паратион, гутион и шрадан. [c.168] Более прямые доказательства привели Гейдж и Пейтон [41] и Гейдж [40]. Они вводили крысам паратион и через 10 мин после смерти удаляли у животных печень и экстрагировали ее ацетоном. [c.168] Экстракт хроматографировали на колонке, наполненной порошком целлюлозы, в результате чего были получены три фракции, каждая из которых имела максимум поглощения при 265 ммк. Вторая фракция содержала всю антихолинэстеразную активность в виде одного-единственного компонента, насколько можно было судить по повторной хроматографии на такой же колонке и по хроматографии на бумаге. По антихолинэстеразной активности, ультрафиолетовому спектру, поведению при хроматографии на бумаге и константам гидролиза этот компонент был идентифицирован как параоксон. [c.169] Мерфи и Дю Буа [69] изучили активирование тионфосфата гутиона в зависимости от возраста и пола животных. В этих опытах были использованы нефракционированные гомогенаты печени с добавлением никотинамида и ДПН. У крыс в возрасте до 30 дней активирующая эффективность печени самцов и самок была одинаковой, в дальнейшем наблюдалось расхождение, показанное на рис. 23. Введение самкам крыс тестостерона в течение 6 недель повышало активирующую способность их печени до уровня самцов. Если молодых крыс-самцов подвергали кастрации, то характерный подъем активирующей способности после достижения 30-дневного возраста не наблюдался введение диэтилстильбестрола или прогестерона взрослым самцам в течение месяца снижало активирующую эффективность их печени до уровня, наблюдавшегося у самок. Таким образом, активирование гутиона печенью в большой степени зависйт от пола и возраста. [c.169] Содержание фермента, активирующего гутион, в регенерирующей печени было низким это значит, что процессы регенерации в печени происходят с большей скоростью, чем синтез фермента. Введение однократной дозы карциногена — 3-метилхолантрена — взрослым самкам или молодым самцам повышало активирующую способность печени в 2—3 раза, но эти дозы почти не оказывали никакого эффекта на взрослых самцов. Создается впечатление, что печень взрослых самцов обладает максимально возможной активностью (экспериментально было показано, что это не обусловлено действием растворимого активирующего фактора, содержащегося в печени взрослых самцов). Стимулирующий эффект 3-метилхолантрена полностью предотвращался предварительным введением этионина. Совершенно такое же антагонистическое действие оказывали эти два вещества на другую ферментную систему микросом, катализирующую деметилирование 4-диметиламиноазобензола. [c.170] Поэтому маловероятно, чтобы оба процесса вызывались одной и той же ферментной системой. С другой стороны, потребность в кофакторах И поведение в отношении ингибиторов оказались очень сходными для обеих реакций. Но вместе с тем отмечены некоторые различия в рН-оптимуме и было показано, что отношение активности печени самок к активности печени самцов равно 8 для парати- она и лишь около 0,5 для шрадана [29]. [c.171] Этот вопрос может быть решен только путем фракционирования микросом, однако такая процедура требует предварительного растворения микросом, а все попытки растворения приводили к утрате активности. Инактивация, возможно, связана с тем, что растворимые препараты микросом нуждаются в иных, конечных акцепторах электронов, чем кислород однако такая возможность до сих пор не изучена. Другой путь исследования мог бы состоять в открытии ингибиторов, специфичных по отношению к начальным ферментам такие ингибиторы могли бы, например, затормозить систему, активирующую шрадан, не влияя на способность микросом активировать паратион. [c.172] Вернуться к основной статье