ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Факторы, влияющие на степень разделения растворенных веществ из "Газовая хроматография в биохимии" Факторы, оказывающие влияние на разделение пиков. [c.22] Неразделенные пики. Б. Разделение за счет изменения коэффициента разделения. В. Разделение за счет увеличения эффективности колонки. [c.22] Взаимозависимость этих двух факторов показана на фиг. 4. На фиг. [c.22] Коэффициенты разделения можно подогнать, подбирая неподвижную фазу или изменяя температуру колонки. Они зависят только от отношения коэффициентов распределения двух растворенных веществ между растворителем и носителем. Если эту величину нельзя улучшить путем изменения температуры, необходимо заменить неподвижную фазу. К счастью, имеется много жидкостей, обладающих большой селективностью, основанной на полярности (см. раздел В, II). Следовательно, обычно можно подобрать жидкость, обеспечивающую требуемую степень разделения даже при практически одинаковых температурах кипения растворенных веществ,поскольку парциальные давления их паров при растворении в растворителе различны. [c.23] Эффективность колонки измеряют числом теоретических тарелок. В процессе разделения, осуществляемого в виде отдельных ступеней, как, например, при противоточной экстракции, на каждой ступени устанавливается полное равновесие растворенных веществ между двумя фазами, после чего фазы разделяются. Каждую ступень называют теоретической тарелкой. Однако в хроматографической колонке растворенное вещество непрерывно движется вниз вдоль колонки, и полное равновесие не может установиться ни в одной точке. Следовательно, можно только рассчитать высоту колонки, которая будет давать разделение эквивалентно одной теоретической тарелке. Эту величину называют высотой, эквивалентной теоретической тарелке (ВЭТТ). Число теоретических тарелок в газо-хроматографической колонке зависит от ряда факторов, включающих скорость диффузии растворенного вещества в двух фазах, равномерность набивки колонки, толщину слоя неподвижной жидкой фазы, а также природу и скорость потока подвижной фазы. Число теоретических тарелок можно повысить в определенных пределах, увеличивая длину колонки, и оно несколько уменьшается при увеличении диаметра. [c.23] Число теоретических тарелок изменяется в зависимости от природы растворенного вещества, образующего пик, используемый для измерения, а также от характеристик колонки. Поэтому при опубликовании результатов необходимо указывать соединение, примерявшееся для проведения расчета, поскольку на одной и той же колонке при одинаковой скорости потока можно получить различное число теоретических тарелок, если ВЭТТ рассчитывать по двум разным пикам. Удерживаемый объем и ширину пика в вышеприведенном уравнении нужно измерять в одинаковых единицах, чтобы их отношение п было безразмерным. При использовании исправленного удерживаемого объема в значение наблюдаемой ширины пика также следует вводить поправку на перепад давления по колонке. [c.24] На оси абсцисс (см. фиг. 5) находят точку, соответствующую 1 10 , и восстанавливают из нее перпендикуляр до пересечения с линией, соответствующей коэффициенту разделения для данной пары растворенных веществ. Затем проводят вправо линию параллельно оси абсцисс до пересечения с осью ординат Точка пересечения дает число теоретических тарелок, необходимое для разделения. Например, если в этом случае а= 1,05, то для достижения описанного выше разделения требуется 15 ООО теоретических тарелок. Но если а=2,0, точно такие же результаты можно получить на колонке, имеющей всего лишь 70—80 теоретических тарелок. [c.26] Вернуться к основной статье