ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Наблюдение за образованием и исчезновением промежуточного соединения из "Катализ в химии и энзимологии" Случай б) — это возможное объяснение быстрого образования продукта в начальный период при гидролизе АТФ, катализируемом миозин-АТФ-азой [3]. При некоторых экспериментальных условиях величина выброса продукта соответствует выделению 1 моля фосфата на каждый моль миозина. Если ситуация б) правильно объясняет данное явление, то это значит, что связывание АТФ с эквимолярпым ко.личеством фермента вызывает конфор-мациопное изменение (возникающее, возможно, параллельно с реакцией гидролиза), которое приводит к образованию менее активной формы фермента Е. Возможность появления таких изменений, индуцируемых в белковой молекуле химической реакцией, имеет особое значение для фермента, который участвует в превращении химической энергии в механическую в процессе сжатия мускулов. [c.46] За образованием и распадом фермент-субстратных промежуточных соединений можно непосредственно наблюдать в случае медленно реагирующих субстратов, или в неблагоприятных условиях для протекания реакции. [c.47] Краситель профлавин связывается с активным центром химотрипсина, при этом спектральные свойства его изменяются. Наблюдаемое смещение спектра можно положить в основу метода измерения констант скоростей и равновесий нри образовании и распаде фермент-субстратных промежуточных продуктов, поскольку взаимодействие субстрата с активным центром предотвращает связывание красителя [8]. [c.48] Основное экспериментальное ограничение всех этих методов заключается в том, что за образованием и распадом промежуточных соединений можно наблюдать непосредственно лишь при наличии значительных количеств чистого фермента. Ниже описаны косвенные методы, которые позволяют использовать для этой же цели каталитические количества фермента, и нет необходимости даже применять чистый фермент, если только примеси не влияют на его активность. [c.48] Вернуться к основной статье