ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Конечные аминокислоты в пептидах ибелках (Перевод Р. А. Дулицкой) из "Химия белка" Методы использования молочнокислых бактерий. Составы сред, применяемых для анализа аминокислот с применением молочнокислых бактерий, сопоставлены в табл. 9. [c.189] Рекомендуется при испытании на лейцин, валин. L. asei или L. arabinosus поддерживает рост всех молочнокислых бактерий, для которых известны потребности в питании, и поэтому при.менима в качестве основной среды для испытания других аминокислот при исключении из среды испытуемой аминокислоты. [c.192] Большинство средств содержат больше Na l, чем это указано, вследствие растворения или предохранения некоторых составных частей среды посредством НС1 и последующей нейтрализации. [c.192] Выражено в микрограммах вещества в 40 000 раз более активного, чем произвольный стандарт из печени В. 0,1 т вещества такой активности примерно в 20 раз превосходит количество, необходимое для максимального роста L. asei в среде, свободной от фолиевой кислоты. Для работы пригодны неочищенные концентраты этого вещества. [c.192] Среди различных исследователей, применявших 1- или /-формы аминокислот, но имеется согласия. Все сравнения в этой таблице даны на основе веса встречающегося в природе изомера. Если применялись с//-амигго ислоты, прибавленное количество было вдвое больше, чем указано. В большинстве случаев этот прием справедлив, так как до сих пор все неприродные изомеры аминокислот не поддерживали роста организма в заметной степени. [c.192] Кривая роста при прибавлении /(+) аргинина в данных условиях показана на рис. 16. Полученные результаты анализа приведены в табл. 10. Они находятся в превосходном согласии со значениями, полученными путем прямого выделения аргинина в виде его монофлавианата. Была получена количественная полнота определения прибавленного аргинина другие критерии надежности результатов также были удовлетворены. Таким образом метод дает надежные результаты для гидролизатов различных белков. [c.195] ИЛИ цитруллин дают тот же эффект, что и аргинин на рост L. arabinosus. С L. asei орнитин вместо аргинина не определяется цитруллин не испытывался d —) аргинин неактивен [97]. Значения для аргинина, полученные для продуктов энзиматического переваривания белков, оказываются заниженными повидимому, аргинин не всегда полностью усваивается, когда он связан в пептидной цепи. [c.196] Данна рассчитывались для влажного беззольного вещества. Другие авторы не уточняли условий. Различные авторы применяли для гидролиза различные температурные интервалы времени и концентрации кислот. Некоторые авторы [39, 40] применяли серную кислоту для гидролиза и удаляли ион сульфата гидроокисью бария, что может приводить к потере аминокислот. Другие применяли соляную кислоту и просто нейтрализовали ее едким натром перед анализом. Все эти факторы надо учитывать или же определять их влияние на результаты анализа, прежде чем сопоставлять данные, полученные в различных лабораториях и различными методами. Было указано, что для получения максимального значения валина необходим длительный период гидролиза по сравнению с другими аминокислотами [53]. [c.197] С Валином, изолейцином и лейцином только те аминокислоты эффективно ускоряют рост, которые имеют /-конфигурацию. При применяемых концентрациях присутствие л -изомера (например, в (//-смесях) не стимулирует и не подавляет эффекта /-изомера. Это весьма ценно, так как при приготовлении среды синтетические аминокислоты часто применяются взамен выделенных аминокислот. Фокс и др. [24] показали, что d-лейцин препятствует росту L. arabinosus, если его прибавить к среде в очень высокой концентрации /-лейцин в той же концентрации не оказывает влияния. Применяемая концентрация была в 50—100 раз выше, чем обычно применяемая в испытуемой среде, и в 1000 раз выше, чем необходимо для определения лейцина. [c.198] ОКИСЬЮ бария результаты ниже, чем полученные при ферментативном переваривании, и должны быть умножены на два, если в качестве стандарта применяется -триптофан. Все же значения, полученные при ферментативном переваривании, часто низки, указывая, что триптофан используется неполностью при определении. Это согласуется с данными, сообщенными выше для других аминокислот, определяемых при неполном гидролизе . [c.199] Как сообщено Снеллом [83J, эти исследователи нашли, что индол и антраниловая кислота могут замещать триптофан для роста L. arabinosus. Так как оба вещества встречаются в природе, они должны быть удалены перед анализом, что достигается их экстрагированием эфиром пз гидролизованного образца при pH 4,0 перед анализом 2. Другие соединения, встречающиеся в природе и близкие по структуре к триптофану, не влияют на ускорение роста. К их числу относятся скатол, индолилмасляная кислота, нндолилпропионовая кислота, индолилуксусная кислота, кинуреновая кислота и триптамин. [c.199] Метод дает совпадающие результаты при повторных анализах, согласующиеся значения при возрастании концентрации и количественную полноту определения прибавленного триптофана. Он дает значения, достаточно близкие к получаемым в настоящее время другими методами, но часто дает данные, отличающиеся от сообщенных в более ранней литературе (см. табл 13). Сюлливан и Гесс [98] указали на некоторые другие факторы, которые влияют на непостоянство значений для триптофана, полученных колориметрическим методом. [c.199] Аналогичная методика описана Данном и сотрудниками [20] для определения свободного триптофана в крови. [c.199] Яичный альбумин. Лактальбумин. . [c.200] Это поведение показывает, согласно Лиману и др. [50], что по крайней мере часть глютаминовой кислоты должна до усвоения превратиться в некоторое другое вещество и что это превращение ускоряется микроорганизмом только в том случае, если концентрация глютаминовой кислоты высока или если уже начался значительный рост. Наиболее очевидной возможностью для достижения роста является применение глютамина, который хорошо известен как стимулятор роста для многих микроорганизмов, Biuiro-чая некоторые молочнокислые бактерии. Эти авторы нашли [22, 43, 52, 60, 69], что прибавление к испытуемой среде малых количеств глютамина позволяет начаться росту и что полученная затем кривая роста для глютаминовой кислоты закономерно растет с возрастанием концентрации. [c.201] Вернуться к основной статье