ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Защита и деблокирование функциональных групп боковых цепей из "Твердофазный синтез пептидов" При твердофазном синтезе, как и при синтезе пептидов классическими методами, функциональные группы боковых радикалов трифункциональных аминокислот необходимо защищать во время проведения синтеза. Защитные группы, применяемые с этой целью, должны быть устойчивы ко всем реагентам, используемым для удаления а-аминозащитных групп в процессе синтеза, и должны легко удаляться в конце синтеза реагентами, которые не затрагивали бы пептидных связей и не подвергали бы изменениям аминокислотные остатки. Эти проблемы в твердофазном синтезе иногда усложняются необходимостью использования избытка активированной аминокислоты на каждой стадии конденсации. В настоящее время для всех трифункциональных аминокислот найдены подходящие защитные группы, удовлегворяющие требованиям твердофазного метода. [c.51] Каталитическое гидрирование обычно не удается в случае пептидов, содержащих цистеин или метионин, так как сера отравляет катализатор. Тем не менее описан один случай успешного восстановления остатка нитроаргинина (над свежеприготовленной палладиевой чернью) в пептиде, содержащем метионин [74], и один катализатор (окись палладия на сульфате бария), который удовлетворительно функционировал в присутствии цистеина [51]. Одно из возможных осложнений при использовании этого метода —образование пептидов, содержащих продукты лишь частичного восстановления нитроаргинина [43]. Если пептид содержит цистеин (защищенный в виде 5-бен-зильного производного), то аргинин обычно вводят в виде Ы -тозильного производного, а затем защитные группы с обоих остатков удаляют обработкой отщепленного от полимерного носителя пептида натрием в жидком аммиаке. Однако последняя процедура рискованна, особенно для пролинсодержащих пептидов [8, 80]. Если для одновременного отщепления от полимерного носителя и деблокирования пептида применяют безводный фтористый водород, аргинин следует вводить в виде нитроаргинина, так как последний легко расщепляется фтористым водородом до аргинина [106]. [c.52] Для маскирования е-аминогрупп лизина при твердофазном пептидном синтезе также успешно применяли трифторацетильную защитную группу [93]. Эту группу удаляли из полученного пептида обработкой последнего 1 М раствором пиперидина при 0° в течение 1—2 час однако иногда эта реакция деблокирования может протекать очень медленно. [c.53] Недавно установленный факт, что динитрофениль-ные группы можно легко отщеплять от имидазольного кольца гистидина действием тиолов при pH 8 и комнатной температуре [П9] позволяет рассчитывать на получение удобной защитной группы для бокового радикала гистидина при твердофазном синтезе (рис. 12). Предварительно полученные результаты имеют весьма обнадеживающий характер [57] . [c.55] В одном кратком сообщении [55] указано, что можно проводить твердофазный синтез гистидиновых пептидов без защиты имидазольного кольца этой аминокислоты. [c.55] Когда для удаления карбобензоксигрупп или сложных либо простых бензиловых эфиров используют безводный фтористый водород или бромистый водород в трифторуксусной кислоте, бензильная группа отщепляется в виде фтористого или бромистого бензила соответственно. Чтобы гарантировать полное удаление бензильных групп из цистеина и предотвратить бен-. шлирование метионина и тирозина, необходимо прибавлять в реакционную смесь вещество, способное связывать образующийся бензилгалогенид. Для защиты остатков цистеина и метионина во время обработки бромистым водородом в трифторуксусной кислоте применяют большой избыток метилэтилсульфида, диэтилфосфита [32] или свободного метионина [62], а при использовании фтористого водорода для защиты всех чувствительных аминокислотных остатков применяют анизол. [c.57] Вернуться к основной статье