ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Реактивы для проявления и идентификации из "Твердофазный синтез пептидов" Забуференный нингидриновый реактив. Хроматограммы опрыскивают смесью уксусной кислоты (3 мл), пиридина (1,5 мл), ацетона (96 мл) и нингидрина (10 мг)-, бумажные листы можно погружать в эту смесь. Затем хроматограммы сушат на воздухе, после чего помещают на 5 мин в сушильный шкаф с температурой 105°. Каждый день следует готовить свежий нингидриновый реактив. Пиридин перед использованием необходимо перегнать над нингидрином. Для проявления аминокислот берут 1 мкл раствора с концентрацией 1 мг1мл в случае пептидов следует брать большие количества, учитывая при этом длину пептидной цепи. [c.143] Реактивы. 1. Свежеприготовленный водный раствор продажного препарата Хлорокс (см. приложение А), 1 10 (по объему). [c.144] Вместо реактивов 3 и 4 можно использовать смесь 1%-ного раствора растворимого крахмала и 1%-ного водного раствора иодида калия. Воду доводят до кипения и добавляют в нее растворимый крахмал. Затем раствор охлаждают до комнатной температуры и приливают раствор иодида калия. [c.144] Методика. Тщательно высушенные пластинки или пластиковые листы опрыскивают реактивом 1 и сушат их в вытяжном шкафу при комнатной температуре точно 30 мин. Затем опрыскивают реактивом 2, после чего точно через 10 мин опрыскивают смесью (1 1) реактивов 3 и 4 или заменяющим их реактивом. [c.144] Появляющиеся темно-голубые пятна быстро выцветают . Для проявления берут 1 мкл раствора, содержащего 10 лг в 1 мл. [c.144] Очень удобно вместо реактивов 1 и 2 опрыскивать хроматограмму 1 %-ным раствором г ег-бутил-гипохлорита в циклогексане [67]. Избыток этого летучего реактива легко испаряется. Этот вариант проявления очень удобен при ТСХ на силикагеле. [c.145] Проявление п-нитрофениловых эфиров. При умеренном опрыскивании высушенных пластинок 1 н.раствором гидроокиси аммония или 0,5 М раствором карбоната натрия желтая окраска п-нитрофениловых эфиров резко усиливается. [c.145] Проявление аргинина по Сакагучи (не для пластинок с тонким слоем силикагеля). [c.145] Проявление по Паули (тирозин и гистидин). [c.145] Реактивы. 1. Сульфаниловая кислота, 9 г в 90 мл концентрированной соляной кислоты. [c.145] Реактивы 1 и 2 хранят на холоду (при 4°). [c.145] Реактивы. 1. 1-Нитрозо-2-нафтол, 0,1%-ный спиртовой раствор (применять ацетон не рекомендуется). [c.146] Методика. Непосредственно перед применением смешивают реактивы 1 и 2 (9 1) и погружают в эту смесь хроматограмму или ее опрыскивают. Затем хроматограмму сушат сначала 2—3 мин при комнатной температуре, потом в течение 2—3 мин при 105°. Тирозин дает красное окрашивание. Если продолжать нагревание, то окраска бледнеет. [c.146] Проявление триптофана по Эрлиху. [c.146] Реактивы. 1. п-Диметиламинобензальдегид, 10%-ный раствор в концентрированной соляной кислоте. [c.146] Методика. Непосредственно перед проявлением в вытяжном шкафу смешивают реактивы 1 и 2 (1 4) и смачивают этой смесью или опрыскивают ею хроматограмму. Триптофансодержащие вещества через несколько минут приобретают пурпурную окраску. [c.146] Проявление иодом. Многие органические соединения приобретают коричневую окраску при выдерживании в парах иода. Кристаллы иода на часовом стекле помешают в закрытую стеклянную камеру и оставляют там до тех пор, пока камера не наполнится парами иода. Пластинки или пластиковые листы помещают в эту камеру на 5—10 мин. Появляющаяся коричневая окраска быстро исчезает, но ее можно зафиксировать опрыскиванием хроматограммы 1 %-ным раствором крахмала после испарения избытка иода. [c.146] Вернуться к основной статье