ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Флуоресценция из "Фотобиология Изд.2" Одним из способов дезактивации электронно-возбужденных состояний является флуоресценция — физический внутримолекулярный процесс, который описывается уравнением 5 - -5o -Лvфл. Возбужденная молекула переходит в основное состояние за время 10 —10 с с испусканием кванта света. При этом фотоэлектрон опускается на различные колебательные подуровни основного состояния. Как и при поглощении, здесь выполняется принцип Франка—Кондона. Осциллятор флуоресценции обычно совпадает с осциллятором длинноволновой полосы поглощения. Основные характеристики флуоресценции спектры излучения и возбуждения, квантовый выход, время жизни и поляризация. [c.13] Длительность флуоресценции, или время жизни возбужденного состояния (т), непосредственно связана с вероятностью излучательного перехода (Р) и отражает среднестатическое время существования возбужденного состояния. Одномоментно возбужденные молекулы дезактивируются по мономолекулярному (экспоненциальному) закону / = /ое / (т представляет собой время, в течение которого интенсивность свечения уменьшается в е (2,7) раз). Измеренное в эксперименте т имеет заниженное по сравнению с естественным (то), определяемым только внутренними свойствами молекулы, значение, Причиной этого является безызлучательная, тепловая диссипация энергии — тушение второго рода, происходящее в течение всего времени жизни возбужденного состояния. Если то= 1/Я, то т=1/(Я-Ь ), где д — вероятность тушения. Между Вит часто соблюдается пропорциональность, и В/Во=т/то. Длительность затухания флуоресценции в различных участках ее спектра обычно одинакова. [c.15] Отсюда может быть определено т, если известен молекулярный объем (вес). При возбуждении объектов поляризованным монохроматическим светом различных длин волн (Я) Яфл изменяется, принимая как положительные, так и отрицательные значения. [c.16] Завис1 мость Рфл=/(Яв) называется поляризационным спектром флуоресценции (по поглощению). Обычно осцилляторы, соответствующие электронным переходам 5о— -51 и 5о— -52, ответственным за первую и вторую полосы поглощения, взаимно перпендикулярны и лежат в плоскости молекулы (для я— -л -переходов). Именно поэтому Рфл при возбуждении во второй полосе поглощения имеет отрицательные значения. В промежуточных точках значения Рфл связаны с углом между эффективным осциллятором поглощения (сумма взаимно перпендикулярных векторов-осцилляторов с учетом их вкладов в поглощение) и осциллятором флуоресценции. Следовательно, поляризационные спектры флуоресценции по поглощению выявляют взаимоориентацию осцилляторов различных электронных переходов. После расположения молекул в одном преимущественном направлении (наложение электрического поля или механическое растяжение полимерной пленки с включенными в нее молекулами флуорохрома) может быть установлена и абсолютная ориентация осцилляторов относительно скелета молекулы. Осцилляторы, соответствующие п— -я -поглощению и л —)-п-флуоресценции, перпендикулярны к плоскости молекулы. [c.17] Поляризационные спектры флуоресценции по испусканию отражают зависимость Рфл от длины волны регистрации по ее спектру при фиксированной длине волны возбуждения Рфл=ДЯрег). Обычно соблюдается постоянство Рфл по всему спектру флуоресценции, что подтверждает испускание с одного и того же возбужденного уровня. [c.17] Вернуться к основной статье