ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Основной метод работы и его видоизменения из "Типовые реакции ферментативной химии" Питательную среду и аппаратуру, предназначенные для проведения процесса ферментации, обычно стерилизуют паром при 1 ати (12Г) в течение 15 мин. В отдельных случаях требуются более жесткие условия. Такие вещества, как мел, иногда лучше стерилизовать отдельно в сухом виде. В некоторых случаях сахара, обладающие восстановительными свойствами, например глюкозу, приходится стерилизовать паром отдельно, так как сахар может действовать неблагоприятно на другие компоненты питательной среды. Как уже указывалось, окись этилена обладает преимуществом в качестве заменителя пара. Стерилизацию жидкостей, содержащих неустойчивые вещества, осуществляют фильтрованием через фильтры с очень маленькими порами. [c.14] Посевной материал вносят в стерилизованную питательную среду обычно в виде культуры энергично растущих клеток, занимающих 5—10% всего объема. Количество посевного материала и способ его приготовления часто имеют большое значение. Если пользоваться лиофильно высушенной культурой, то ампулу можно открыть и вырастить микроорганизм на косом агаре. Несколько петель выращенного материала переносят затем в жидкую среду, которая после 1-, 2- или 3-кратного перссева с увеличением объема используется для посева в ферментаторе. Многие грибы дают большое количество спор, которые можно прорастить перед ферментацией. Питательная среда, используемая для прорастания спор или посевного материала, приготовленного другими способами, часто до некоторой степени отличается от питательной среды, применяемой для ферментации. [c.14] Для аэробных ферментаций скорость аэрации имеет большое значение. Строго говоря, кислород воздуха представляет собой продукт питания и должен рассматриваться вместе с углеводами, источниками азота и минеральными веществами, но он всегда рассматривается отдельно ввиду резкого отличия его физического состояния, feo всяком случае, для получения большого числа клеток какого-либо микроорганизма необходимо снабжать его всеми основными продуктами питания — углеводами, азотом, фосфатами и кислородом — в больших количествах. Так, например, для быстрого превращения глюкозы в глюконовую кислоту необходимо пропускать большие количества кислорода. Поэтому важно измерять скорость поглощения последнего. Обычно это измерение проводят, используя раствор сульфита вместо ферментационной среды при сохранении всех других условий [3]. Скорость поглощения выражают в миллимолях кислорода, поглощенного 1 л раствора в 1 мин. При определении в различных условиях были получены данные, приведенные в таблице. [c.15] Как правило, в процессе ферментации необходимо регулировать температуру, что достигается инкубацией колб в помещении с постоянной температурой, погрул-сением ферментатора в водяную баню или пропусканием воды через рубашку ферментатора. Ферментации проводят при 25—40°, чаще всего при 25-30°. [c.15] Регулирование pH среды также имеет большое значение. Так, например, лимонная и итаконовая кислоты образуются плесенями лучше всего при относительно низких значениях pH, для чего в начале процесса можно использовать соляную или серную кислоту, но лучше прибавить немного лимонной или итаконовой кислоты. Превраш,ение глюкозы в глюконовую кислоту происходит лучше в нейтральной среде или при pH 6,5, поэтому в процессе ферментации приходится непрерывно добавлять щелочь. Связанные с этим повторные пробы и добавки сильно увеличивают опасность заражения кроме того, при этом трудно следить за объемом. Если получают какую-либо кальциевую соль, например глюконат кальция, то вопрос разрешается прибавлением избытка мела в начале ферментации образующаяся кислота автоматически нейтрализуется. Во многих случаях лучше всего проводить реакцию в ферментаторе емкостью 20 л, снабл енном автоматическим приспособлением для титрования, благодаря чему значение pH сохраняется постоянным, а вся система остается закрытой и стерильной при этом жидкость может циркулировать из главного фэрментатора в небольшую камеру с электродами. [c.16] необходимое для ферментации, может колебаться в широких пределах — от 20 час для превращения 15 и-ного раствора глюкозы в глюконовую кислоту до 6—8 дней для превращения 10, о-ного раствора того же сахара в итаконовую кислоту. Чем быстрее протекает ферментация, тем выше эффективность производственного процесса. [c.16] Не все субстраты, которые желательно подвергнуть ферментации, растворяются в воде. Так, например, нерастворимый в воде прогестерон для лучшего контакта с ферментирующим микроорганизмом можно растворить в небольшом количестве спирта или ацетона и затем вылить раствор в водную среду, в результате чего образуется тонкая суспензия. Даже в тех случаях, когда одна из составных частей среды или специфический субстрат растворимы в воде, иногда достигается лучший результат при постепенном внесении каждого из них в отдельности. [c.16] Вернуться к основной статье