ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Физико-химические свойства составных частей геля из "Электрофорез в разделении биологических макромолекул" Чистота составных компонентов полиакриламидного геля может сильно варьировать в зависимости от источника Их получения. Для очистки акриламида предложено несколько методов. В одном из них [777] акриламид перекристаллизовывают из хлороформа. Для этого 70 г акриламида растворяют в 1 л хлороформа при 50 Т. Горячий раствор фильтруют без отсасывания и охлаждают до —20Образовавшиеся кристаллы отфильтровывают на охлажденной воронке, промывают холодным хлороформом или гептаном, или смесью обоих растворителей и высушивают. [c.91] Акриловая кислота, которая может снижать электрофоретическую подвижность некоторых белков [1064], полностью не удаляется перекристаллизацией. Для освобождения от нее предложено использовать ионообменную хроматографию [839] при условии, что будут Приняты (необходимые меры, препятст--вующие полимеризации акриламида. [c.92] Перекристаллизация бис-акриламида [777]. Быс-акриламид растворяют в ацетоне при 40—50 С до концентрации 10 г/л, горячий раствор фильтруют и медленно охлаждают до —20 °С.. Выпавшие кристаллы промывают охлажденным ацетоном и вы--сушивают в вакууме. [c.92] Очистка ДСН [259, 1134]. 300 г ДСН растворяют в 7 л ки- пящего этанола и гарячий раствор фильтруют на воронке Бюх-лера через лист целита. ДСН кристаллизуют при 0°С или ниже. [c.92] Деионизация мочевины. 1 л 10 М мочевины перемешивают в течение 1 ч с 30—100 мл смеси ионообменных смол, фильтруют и хранят при 3—6°С. В некоторых случаях более целесообразно обработать мочевину активированным углем. Полноту удаления ионов можно проверить путем измерения электропроводности раствора. [c.92] Определение концентрации веществ, применяемых для при--готовления гелей. Концентрацию органических веществ, содержащих азот, определяют по Кьельдалю. Для количественного определения акриламида разработан потенциометрический метод [1433]. Можно использовать также приемы, основанные на васыщении двойной связи. [c.92] Приведем методику определения содержания акриламида и быс-акриламида по Мауреру [839]. Необходимые реактивы 0,1 н. КВгОз—КВг (2,79 г КВгОз+10 КВг в 1 л раствора) 6 н. H2SO4 20%-ный раствор KI 0,1 н. МагБгОз 1%- Ный раствор крахмала. [c.92] ТЕМЭД анализируют при помощи газовой хроматографии. [c.93] Концентрацию ДСН можно определять методами газовой хроматографии [1187] или спектрофотометрии [529, 662, 888, 1013, 1081, 1364]. [c.93] В растворах мочевины может образовываться цианат, вызывающий карбамилирование белков, степень которого зависит от pH и температуры [241]. Для определения содержания циа-ната в растворах существует специальный метод [1459]. [c.93] Токсичность акриламида. Акриламид токсичен даже в разбавленных растворах (около 1%), поэтому следует остерегаться попадания его на кожу и дыхания распыленных частиц. [c.93] Вернуться к основной статье