ПОИСК Статьи Рисунки Таблицы Изменения в химическом составе хроматина при его активации из "Гены высших организмов и их экспрессия" Удаление гистона Н1 из транскрипционно активного хроматина [151 —154]. В ранних опытах Дж. Боннера (США) было показано, что ДНК в составе хроматина является гбраздо худшей матрицей, чем свободная ДНК-На основании этих наблюдений было высказано предположение, что гистоны являются репрессорами транскрипции. [c.143] а [у- Р] — только в начало аепи (ррА- или ppG)- Иными словами, включение [ Р] давало информацию об инициации синтеза, а [ С1 — о самом синтезе РНК- В части опытов через 3—4 мин после начала инкубации в среду добавляли рифампицин-антибиотик, препятствующий инициации новых цепей РНК, ко не влияющий на уже начатый синтез, т, е. на элонгацию. [c.144] гибридизационные свойства РНК, синтезированной на матрице такого хроматина и на матрице свободной ДНК, становились неразличимыми. Мы предположили, что гистоны Н2а, Н2Ь, НЗ и Н4 (тогда их называли иначе — умеренно богатые лизином и богатые аргинином гистоны) не участвуют в подавлении транскрипции, а играют чисто структурную роль в организации хроматина, тогда как гистон Н1 (в старой терминологии гистон, богатый лизином) является ингибитором синтеза РНК. Одновременно он же является фактором, обусловливающим конденсацию хро-.матина (см. выше). [c.146] ДНП — ДНП, изолированный с помощью обработки мочевиной, который полностью солюбилизирован, но при этом сохраняет гистон Н1. [c.146] В свете современных данных о соленоидном строении 300 А-ДНП фибриллы, которое зависит от присутствия гистона Н1, этот результат легко объясним. Действительно, в соленоиде РНК-полимераза, очевидно, не может прочитать более 100 п. н. из-за чисто топологических запретов. [c.147] Согласно нашей гипотезе, при активации гена должно было происходить удаление гистона Н1, Одндко проверить ее в то время не удалось. Лишь сравнительно недавно появились данные об утрате гистона Н1 из хроматина при активации генов. Так, при выделении активно транскрибируемых областей хроматина, например мини-ядрышек из ряда организмов, в них не был обнаружен гистон Н1. Нет его и у дрожжей, где все гены потенциально активны. [c.147] Хотя все имеющиеся сейчас данные, взятые по отдельности позволяют и другие интерпретации, в совокупности они служат серьезным свидетельством в пользу удаления гистона Н1 из активного хроматина. Однако механизм этого процесса пока совершенно неясен. [c.150] Судьба нуклеосом при активации хроматина [154— 157]. Менее однозначным является вопрос о судьбе гистонов Н2а, Н2Ь, НЗ и Н4, формирующих сердцевину нуклеосомы. В вышеупомянутых опытах Ю. В. Козлова их присутствие практически не влияло на транскрипцию ДНК РНК-полимеразой из Е. соП. При изучении продуктов гидролиза хроматина эукариот многие авторы нашли, что нуклеосомы содержат ДНК активных генов, т. е. последние тоже организованы в нуклеосомы. Полученные на большом экспериментальном материале данные А. Д. Мирзабекова и сотр. показывают, что нуклеосомы, содержащие активно транскрибируемую ДНК, принципиально устроены так же, как и нуклеосомы, содержащие неактивную ДНК, хотя некоторые ДНК-гистоновые контакты в них изменяются. [c.150] Все перечисленные выше результаты не являются прямыми, и поэтому окончательное решение вопроса о судьбе нуклеосом при транскрипции должны дать будущие эксперименты. [c.153] Особое положение занимает гистон Ш. Для него существуют варианты, резко отличающиеся по своей структурной организации. Таким вариантом является, например, гистон Н5, который замещает значительную часть гистона Н1 в ядрах эритроцитов птиц. По всей вероятности, это замещение является важным фактором полного выключения транскрипции в ядрах эритроцитов. В обычных клетках существует вариант гистона Ш — гистон Н1 . Его содержание составляет малую долю от всего гистона Н1. Есть ряд противоречащих друг другу данных о том, что Н1 связан с активными генами или, наоборот, с устойчиво выключенными генами. Вопрос остается открытым. [c.156] Длина фрагмента ДНК, п. н. [c.160] В частности, недавно А. Д. Мирзабеков и сотр. с помощью метода гибридизации с белковыми тканями получили данные об обеднении активного хроматина HMG-14 и HMG-17. Поскольку, однако, все вышеперечисленные данные являются косвенными, в целом вопрос о роли HMG-белков остается открытым и требует дальнейшего изучения. [c.160] Антибиотик каптотецин является ингибитором топо I, причем при обработке им клеток фермент образует ковалентные сшивки с ДНК в том месте, где он находился в момент контакта с антибиотиком. Место таких сшивок легко определить методом картирования с помощью гибридизационной метки. Этим путем было обнаружено, что топо I присутствует исключительно в транскрибируемых областях генома, т. е., вероятнее всего, она работает в кооперации с РНК-полимеразой П, снимая возникающие при транскрипции местные перекручивания ДНК. [c.161] Другим белковым компонентом, выявляемым в транскрибируемых областях генома, является набор белков, прочно связанных с ДНК (ПСБ), которая соответствует транскрибируемой ДНК клетки (см. разд. 3.4). [c.161] Вернуться к основной статье